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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 英文名:
HRP 标记的抗生物素抗体
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
10μL
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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HRP 标记的抗生物素抗体10μL规格详细介绍:
操作步骤:
1. HRP 标记的抗生物素抗体10μL规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是HRP 标记的抗生物素抗体10μL规格的相关产品:
多烯紫杉醇三水(标准品)148408-66-6质量规格:HPLC>99%,标准品
盐酸多奈哌齐III型120011-70-3质量规格:>99%,III型
盐酸多奈哌齐III型(标准品)120011-70-3质量规格:HPLC>98%,标准品
达马莫德285983-48-4质量规格:含量>98.5%,类白色粉末
盐酸多佐胺;盐酸杜塞酰胺130693-82-2质量规格:>99%,USP31
晕苯(>95.0%(GC))Coronene质量规格:>95.0%(GC)
晕苯(升华提纯)(>98.0%(GC))Coronene (purified by sublimation)质量规格:>98.0%(GC)
心环烯(>97.0%(GC))Corannulene质量规格:>97.0%(GC)
2,5-二苯基-1,3,4-恶二唑(>98.0%(HPLC))2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole质量规格:>98.0%(HPLC)
2,5-二(1-萘基)-1,3,4-恶二唑(>98.0%(N)(HPLC))2,5-Di(1-naphthyl)-1,3,4-oxadiazole质量规格:>98.0%(N)(HPLC)
吲哚美辛质量规格:>99%,AR,BP2010Indometacin
吲哚美辛(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Indometacin
西米替汀质量规格:>99%,USP32,A型Cimetidine
西米替汀(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Cimetidine
阿德福韦/阿德福韦酯质量规格:>99%,可用于细胞培养Adefovir dipivoxil
鲍氏志贺菌CMCC51522冻干粉南京便诊 结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂90mm 10 个/包
运动发酵单孢菌 马红球菌
青春双歧杆菌 炭球菌
热带灵芝 蜜环菌
鲁氏毛霉 苏云金芽胞杆菌山东亚种Bacillusthuringiensissubsp.shandongiensis
大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种 营养琼脂(NAP)[肉汤琼脂平板][空气平皿]70mm
耐放射异常球菌 昆明链霉菌
胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)90mm 嗜热链球菌
丝状链霉菌 白地霉
脱硫弧菌脱硫亚种(脱硫微螺菌、脱硫螺菌、脱硫杆菌、脱硫芽孢弧菌、脱硫弧菌) 贝酵母
HRP 标记的抗生物素抗体10μL规格发酵性酵母 草菇
天蓝色链霉菌 福氏志贺氏菌
田菁根瘤菌 杜鹃盘多毛孢霉 Pestalotia rhododendri
木醋杆菌 石刁柏(芦笋)拟茎点霉 Phomopsis asparagi
肺炎链球菌ATCC49619冻干粉 烟草疫霉* Phytophthora nicotianae
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文献和实验萘酚贮存液的准备:用 10 mL 无水乙醇溶解 0.3 g 氯萘酚,贮存于 -20℃; (2) 加 100 μL 氯萘酚贮存液至 10 mL 0.05 mol/LTris(pH7.6); (3) 加0.1 mL 3% 过氧化氢于水中。过氧化氢一般是以 30% 的溶液提供,4℃ 可存放 1 个月; (4) 白色沉淀可用滤纸过滤去除; (5) 加此溶液到标本中,并在室温孵育 10~40 min,水洗终止反应; (6) 优化:如果需要,进行复染,但只可使用水溶性染料; (7) 用 Gelvatol
问:有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊,能不能把你们的步骤发给我。本人开始做,发现很多人用的浓度都不一样。答:1.1 试剂准备1) 10mg/mL HRP2) 0.06mol/L NaIO43) 0.16mol/L乙二醇4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中,调pH值到9.5)5) 2.5mg/mL NaBH46) 0.01mol/L磷酸盐缓冲液,pH7.41.2 操作步骤1. 10mg/mL取HRP VmL,溶液为棕黄色,加入
显色(HRP酶) 1.增强化学发光法(ECL) Ecl 显色原理:氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,4-酞嗪二酮)的分子结构及化学反应式如下: 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中,含有H2O2和鲁米诺,在HRP(辣根过氧化物酶)的作用下,发出荧光来。 试验步骤: 1)将两种显色底物1:1等体积混合(一般各1ml/membrane)。
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