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- 基于CRISPR/Cas9技术的基因敲除细胞系定制，提供单克隆细胞
- 上海
- 2025年07月10日
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上海派致生物科技有限公司
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基于CRISPR/Cas9技术基因敲入（knock-in）细胞系定制
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基于CRISPR/Cas9技术基因敲入（knock-in）细胞系定制
技术简介
根据基因敲入位点序列设计合成sgRNA，将Cas9、sgRNA及Donor质粒共同转染目的细胞，通过sgRNA引导Cas9核酸酶对基因敲入位点进行切割，引起DNA双链断裂（Double-strand breaks, DSB），通过同源重组（Homology directed repair，HDR）的方式将外源基因精确敲入到目的细胞基因组中。
技术优势
经过多步优化的CRISPR/Cas9系统，适用于更广泛的哺乳动物细胞，提高了编辑率高，同时大大降低了脱靶效应。
实验流程
服务标准
客户提供：
1. 外源目的基因ID；
2. 基因组敲入位点信息；
3. 目的细胞（可选择由派致代购）；
4. 完全培养基1-2 L（派致提供DMEM及1640常规培养基）。
派致交付：按指定方案构建的细胞系及项目报告。
交付周期：14-35周，具体时间取决于敲入片段大小、细胞类型及生长情况。
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文献和实验近日，赛业生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球专利技术TetraOneTM KO，一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月），而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。TetraOneTM KO的出现，是ES打靶技术制备基因敲除鼠的一个重大突破。基因组编辑的技术进展传统ES打靶、TALEN和CRISPR/Cas9是基因组编辑的三大技术及主要工具。新一代核酸酶基因编辑技术
【原创】基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol
基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9 筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol 上海南方模式生物研究中心 技术顾问 周效华 从2011年科学家实现TALEN技术，2013年科学家实现CRISPR/Cas9技术，这些技术的迅速成熟都给基础生物学研究、临床医学研究提供了更为方便和快捷的分子生物学工具。技术进步必将在未来给科学研究及基因治疗研究带来更为广泛的发力！这在2014年以来的频频出现的Cas9技术在各个领域的应用进展中可以清晰看到。欢迎感兴趣的朋友联系我交流
157(6) (2014) 1262-1278. [5] K.H. Siu, W. Chen, Riboregulated toehold-gated gRNA for programmable CRISPR-Cas9 function, Nat Chem Biol 15(3) (2019) 217-220. [6] X.W. Wang, L.F. Hu, J. Hao, L.Q. Liao, Y.T. Chiu, M. Shi, Y. Wang, A microRNA-inducible
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