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- 辉骏生物CRISPR-Cas9基因敲除单克隆细胞株构建服务,快至6周交付合格细胞株，承诺无效全额退款,不成功不收费.通过精准sgRNA设计、高效转染与单克隆筛选，结合深度测序验证,确保在目标位点实现稳定、纯合的基因敲除.每株细胞均经严格QC,保证基因型明确、表型可靠.辉骏生物基因敲除单克隆细胞株服务已助力多家科研机构和企业完成基因功能研究,缩短研发周期,降低实验成本
- 广东
- 2025年12月25日
企业认证
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- 详细信息
- 技术资料
- 提供商：
辉骏生物
- 服务名称：
基因敲除单克隆株（Crispr-cas9）
- 规格：
基因敲除单克隆株（Crispr-cas9）实验价格请联系辉骏生物：4006991663
基因敲除单克隆细胞株构建技术原理
CRISPR-Cas9是基于细菌和古细菌适应性免疫系统开发的基因编辑技术。该系统包含一个可以特异性识别靶DNA序列的gRNA，和一个可以结合和编辑DNA的Cas9核酸酶，在gRNA的引导下，Cas9蛋白精确识别并切割目标DNA序列。Cas9蛋白中的两个核酸酶活性位点分别切割靶序列中的两条链［一个核酸酶活性位点作用于一条链］，产生双链断裂（DSB） 。双链断裂通常通过非同源末端连接（NHEJ）来修复，在修复过程中，常常会产生非三倍数的插入或缺失（indel），导致移码突变，造成靶基因失活，从而实现基因敲除。
相比于会残留部分基因功能的RNA干扰技术，基因敲除可以将基因功能完全消除，所以已经被越来越多地用于基因功能研究中。
辉骏生物采用CRISPR-Cas9技术构建的基因敲除单克隆细胞株，可实现对细胞基因组靶位点的永久敲除。
基因敲除单克隆细胞株构建技术优势
1.非病毒系统的基因递送：电转法，可实现高效基因递送且脱靶率低
2.周期短：不需要进行慢病毒包装等步骤，实验周期短，细胞交付快至6周
3.使用高效的电转设备，具备更高的电转效率和细胞存活率
4.优化的单克隆细胞筛选方法，阳性率大幅提高，使实验一步到位
基因敲除单克隆细胞株构建实验流程图
基因敲除单克隆细胞株构建 * 辉骏服务内容
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服务内容 |
交付内容 |
周期 |
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1. 预实验： 细胞转导测试、抗性筛选测试、单克隆生长测试 |
1、单克隆细胞株：2个T25瓶（10^6个细胞/瓶） 2、结题报告：质粒构建、克隆筛选、敲除鉴定等操作和结果 |
6-10周 |
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2. 正式实验： gRNA序列设计、cas9-gRNA载体构建、电转细胞、多克隆细胞株筛选、单克隆细胞株筛选、敲除效率验证、细胞扩大培养和保存 |
基因敲除单克隆细胞株构建 * 辉骏服务优势
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效果保障，不成功不收费 无效全额退款，100%保证目标基因编辑/表达效果 |
效率保障 快至6周可交付合格细胞株 |
售后保障 实验疑问随时快速响应 |
基因敲除单克隆细胞株构建实验 * 辉骏生物服务案例
本案例在人HCT116细胞中进行基因编辑，电转后筛选获得的单克隆细胞，通过PCR和Sanger测序验证表明，该细胞在sgRNA2和sigRNA3靶位点分别发生缺失1个碱基的纯合突变，可引起移码敲除。Western-Blot实验确认了敲除结果。
Sanger测序结果图
Western-Blot检测结果图
辉骏实力
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