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膜芯片
人类RTK磷酸化抗体芯片1(71)抗体列表AbL-75
RayBio® Human RTK Phosphorylation Antibody Array 1 (71) Antibody List
半定量检测71个指标
| ABL1 | ErbB3 | NGFR |
| ACK1 | ErbB4 | PDGFR-α |
| ALK | FAK | PDGFR-β |
| Axl | FER | PYK2 |
| Blk | FGFR1 | RET |
| BMX | FGFR2 | ROR1 |
| Btk | FGFR2 | ROR2 |
| Csk | Fgr | ROS |
| Dtk | FRK | RYK |
| EGFR | Fyn | SCFR |
| EphA1 | Hck | SRMS |
| EphA2 | HGFR | SYK |
| EphA3 | IGF-I R | Tec |
| EphA4 | Insulin R | Tie-1 |
| EphA5 | Itk | Tie-2 |
| EphA6 | JAK1 | TNK1 |
| EphA7 | JAK2 | TRKB |
| EphA8 | JAK3 | TXK |
| EphB1 | LCK | Tyk2 |
| EphB2 | LTK | TYRO10 |
| EphB3 | Lyn | VEGFR2 |
| EphB4 | MATK | VEGFR3 |
| EphB6 | M-CSFR | ZAP70 |
| ErbB2 | MUSK |
一、实验原理
该芯片采用夹心法,其原理是将捕获抗体预先固定在固相载体上,生物样品加入到芯片上一起孵育反应后,其特异性的抗原与捕获抗体结合,然后加入生物素标记的检测抗体一起孵育,最后通过HRP-链霉亲和素与化学发光底物、或者荧光染色剂-链霉亲和素结合作为信号检测。基于“三明治”双抗体夹心法建立的芯片,高品质的抗体对是此方法的关键,夹心法有很高的灵敏度,检测浓度可以低至1-10 pg/mL;每增加检测一个蛋白,芯片上就需要增加一个抗体对,这样可能出现交叉反应,因此需要将每个抗体对与芯片上其他抗体对进行检测,验证是否可以引入这个抗体对,且不对其他抗体对检测造成干扰,通过优化筛选将交叉反应降到最小。
由于抗体对之间可能存在的相互影响,夹心法抗体芯片一次性检测蛋白的数量有所限制,但是可以用于蛋白的定量检测。目前,RayBiotech验证配对的抗体对有大于600种抗体对,基于双抗体夹心法开发的半定量芯片有40多种,定量抗体芯片有大于45种,涵盖的因子450多个,包括炎症因子、凋亡因子、生长因子、肥胖因子、血管因子、信号转导磷酸化、白介素等等各个疾病相关的因子。夹心法芯片具有特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好的优点。
二、实验原理图:
三、芯片载体的区别和选择:
RayBiotech 的芯片共有2种载体,一种是膜载体,一种是玻片载体。
1. 膜载体,就类似于Western Blot 实验采用的NC膜或PVDF膜,采用ECL化学发光作为显色信号,这种膜载体相对玻片载体使用时,需要等多一些样品用量,但凡是可以用于WB实验室的都可以使用RayBiotech的膜芯片,通用性高。
2. 玻片载体,是采用载玻片一样的玻璃片作为芯片载体,用Cy3或Cy5,绿色荧光信号作为显色信号,样品用量少,但需要与基因芯片通用的荧光扫描仪。
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