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简介：
Exosome (外泌体)是活细胞分泌的直径约为30-150nm的膜性囊泡，天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳。Exosome携带了包含细胞溶质蛋白、参与细胞内信号转导的蛋白、各种代谢酶、热休克蛋白和四跨膜蛋白及特殊蛋白质，参与细胞活动的重要调控，有望成为多种疾病的早期诊断标志物。Exosome在作为基因和药物运载、肿瘤肿瘤和肿瘤生物学研究方面已经成为热点。
服务内容:
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Exosome (外泌体)是活细胞分泌的直径约为30-150nm的膜性囊泡，天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳。Exosome携带了包含细胞溶质蛋白、参与细胞内信号转导的蛋白、各种代谢酶、热休克蛋白和四跨膜蛋白及特殊蛋白质，参与细胞活动的重要调控，有望成为多种疾病的早期诊断标志物。Exosome在作为基因和药物运载、肿瘤肿瘤和肿瘤生物学研究方面已经成为热点。
服务内容:
- 外泌体提取服务
- 外泌体电镜检测服务
- 外泌体粒径检测服务
- 外泌体基因、蛋白检测分析服务 1) 外泌体microRNA检测分析； 2) 外泌体lncRNA检测分析； 3) 外泌体蛋白表达检测分析；
- 外泌体NSG测序服务
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1、Cd63-GFP真核表达质粒；
2、Cd63-GFP腺病毒颗粒；
研究实例：
胃癌肿瘤细胞来源的exosome对CD8+T细胞的影响：
27a
/b基因敲低后，收集获得exosome。
b) exosome鉴定：
## ELISA(CD63、CD9、CD81)及western blot(CD63、TSG101、Alix、LAMP-2、b-actin、Hsp90、GRP94、EEA1、Cytochrome C)方法检测exosome的表达水平。
## 电镜观察分离的外泌体形态
2、Cd63-GFP腺病毒颗粒；
研究实例：
胃癌肿瘤细胞来源的exosome对CD8+T细胞的影响：
胃癌肿瘤组织与不同分化程度的人源胃癌细胞系MKN45(低分化)、SGC7901（中低分化）、MKN28(高分化)来源的exosome对CD8+T细胞的影响
a) 将不同分期的肿瘤组织及癌旁组织中分离肿瘤细胞以及不同分化程度的人源胃癌细胞系MKN45(低分化)、SGC7901（中低分化）、MKN28(高分化)经体外扩增培养后，以及细胞后续进行Rab
b) exosome鉴定：
## ELISA(CD63、CD9、CD81)及western blot(CD63、TSG101、Alix、LAMP-2、b-actin、Hsp90、GRP94、EEA1、Cytochrome C)方法检测exosome的表达水平。
## 电镜观察分离的外泌体形态
## 纳米颗粒检测。
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文献和实验相关实验
外泌体（Exosomes）作为当前科研界的热度话题，很多人觉得它很神秘，不知道它在疾病治疗或发生、发展中扮演什么样的角色，今天我们跟大家一起基于文献来探讨一下外泌体具有的功能。 先回顾一下外泌体的基础知识。外泌体是细胞分泌到胞外的一种囊泡（Extracellular Vesicles，EVs），其大小为 30-150 nm，具有双层膜结构和茶托状形态，含有丰富的内含物（包括核酸、蛋白和脂质等），参与细胞间的分子传递。 所有的细胞都能分泌外泌体，但是不同细胞分泌的外泌体不管在数量
细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程 1.核对样本 2.离心，3000g，15min； 3.离心后样本（有略微沉淀） 4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂; ECS 与试剂有明显分层； 震荡混匀； 5.在 4 度冰箱静置 2H 以上，离心 10000g，60min； 6.离心后的样本（沉淀明显，沉淀中富含外泌体） 将上清吸出留下沉淀，将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液； 7.加 PBS 重悬沉淀； 用 PBS 洗脱后的沉淀 8.离心进一步去除
近年来外泌体是一个比较热的研究点，本节课介绍了外泌体的项目情况、胞外囊泡、Evs理化特征、外泌体组分、外泌体功能等知识点。
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