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细胞周期检测
细胞周期检测 实验原理
细胞周期( Cell Cycle )是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程, 细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期:即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期,停止细胞分裂,执行一定生物学功能( G0期)。
流式细胞仪PI染色法检测细胞周期的原理:由于细胞周期各时相的DNA含量不同,通常正常细胞的G1/G0期具有二倍体细胞的DNA含量(2N),而G2/ M期具有四倍体细胞的DNA含量(4N),而S期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。PI可以与DNA结合,其荧光强度直接反映了细胞内DNA含量。因此通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0期,S期和G2/M期,获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。
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文献和实验yanjing2001 我用药物处理细胞后,流式检测细胞周期,G1期增加,S期减少,G2基本没有什么变化 问题一:这是说明药物把细胞阻滞在G1期吗? 问题二:把细胞阻滞在G1期与G1/S期阻滞是相同的意思吗? 问题三:想进一步通过western blot 检测cyclin确定G1期阻滞,应该检测cyclin d,还是cyclin d1呢,为什么 请大家帮忙! sunzhihong490
细胞周期(cell cycle)是指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。细胞周期的研究对于深入了解生物的生长发育和控制肿瘤生长等有重要意义。如:在癌症治疗中,G0 期细胞对化疗不敏感,癌细胞难以被有效杀灭,往往成为日后癌症复发的根源。通过诱导 G0 期癌细胞进入细胞周期,提高化疗敏感性,可以有效杀伤癌细胞。 细胞周期的检测,主要是利用细胞内 DNA 能够和某些特定荧光染料(如碘化丙啶,PI)结合的特性。由于细胞各个时期的DNA 含量不同,其结合的荧
一、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞二、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠 0.25gTriton-X 100 0.75mlPropidium iodide 0.025g核糖核酸酶 0.005g蒸馏水 250ml我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失三、染色1、 每一个管子中放入1×106个细胞;2、 样品离心后尽可










