北京现货Rosetta(DE3)感受态细胞销售

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货Rosetta(DE3)感受态细胞销*(代"售")在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货Rosetta(DE3)感受态细胞销*(代"售")
编号：WE0250
规格：100μl×10支
英文名：Rosetta(DE3)Competent Cell
品牌：百奥莱博
产地：北京
  本产品是采用进口Rosetta菌株，经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。Rosetta菌株是携带*霉素抗性质粒BL21的衍生菌，补充大肠杆菌缺乏的6种稀有密码子(AUA，AGG，AGA，CUA，CCC，GGA)对应的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系统中的表达水平。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107。

产品组成：

 

组份	0.1ml×10支
Rosetta(DE3)Competent Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

储存条件：-80℃。

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·2×BaldStar Taq MasterMix(含染料)
编号：WE0112
英文名称：2×BaldStar Taq MasterMix(With Dye)
规格：5ml
  本品是由BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，预混好的PCR混合液使操作更加简单快捷，可最大限度地减少人为误差和污染。该产品所含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效Taq DNA Polymerase，在常温下酶的活性被完全封闭，使得该酶在低温或常温下没有活性，从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的缓冲体系使酶的应用更为广泛，使GC含量高、二级结构复杂以及低拷贝的模板，均能高效扩增，特有的MasterMix配方使整个反应体系稳定性更强。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。用本品进行PCR扩增，PCR产物3"末端含有A，可直接用于T/A克隆。本产品特异性强，PCR扩增后无需胶回收去除杂带，可直接用于下游克隆或芯片杂交等实验。主要应用于常规的PCR、RT-PCR和多重PCR，特别适用于对特异性要求较高的PCR反应。

产品组成：

组份	5ml
2×BaldStar MasterMix(With Dye)	5×1ml
ddH2O	5×1ml

注意：2×BaldStar MasterMix含有BaldStar DNA Polymerase,3.4 mM MgCl2和 400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检测无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残留DNA；
3、能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；
4、2～8℃存放三个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	30 s	30-40 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，退火时间一般为30-60 s，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的BaldStar Taq DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


北京现货Rosetta(DE3)感受态细胞销*(代"售")关键词：Rosetta(DE3)感受态细胞,WE0250,Rosetta(DE3)Competent Cell


·DH5α感受态细胞
编号：WE0252
英文名称：DH5α Competent Cell
规格：100μl×10支
  本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。

产品组成：

组份	0.1ml×10支
DH5α Competent Cell	10×100μl
Control DNA pUC19，0.1ng/μl	10μl

实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。

使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，
倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

储存条件：-80℃。


北京现货Rosetta(DE3)感受态细胞销*(代"售")关键词：Rosetta(DE3)感受态细胞,WE0250,Rosetta(DE3)Competent Cell

SV1019 SplintR 连接酶
HR0109 酵母膜蛋白提取试剂盒 Yeast membrane protein extraction kit
BTN130530 His标签蛋白专用蛋白酶抑制剂 Protease Inhibitor for His-tagged Protein
YT401 核酸酶/DNA清除剂(喷雾清除剂) RNase, DNase and DNA Away
ALH071 血液miRNA提取试剂盒 Blood microRNA Extraction Kit
KFS086 4-20%预制胶(205-6.5 kDa分离范围;12个样/胶)
BTN130630 糖原PAS染色液(真菌专用) Glycogen PAS stain (for fungi)
SY0111 AAT-promoter-Luc荧光素酶报告基因质粒 AAT-promoter luciferase reporter plasmid
HR0387 His标签蛋白纯化填料(带柱子) His tag protein purification packing (with column)
WE0139 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(高含量ROX校正染料) SuperSYBR One Step RT-qPCR Kit(High ROX)
SV0426 HphI限制性内切酶 HphI Restriction Endonuclease
SY0472 细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-EGFP/PI) Annexin V-EGFP/PI Apoptosis Detection Kit
BTN70909 PCR级绿如蓝DNA染料 DNAgreen, PCR Grade
YT148 线粒体膜电位检测试剂盒 Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1

我公司生产供应销*(代"售")的克隆与表达产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购北京现货Rosetta(DE3)感受态细胞销*(代"售")。