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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
DH5α Competent cell
- 库存:
871
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括DH5α化学感受态细胞优惠促销在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:DH5α化学感受态细胞优惠促销
规格:20×100μl
品牌:百奥莱博
英文名:DH5α Competent cell
产地:国产|进口
本公司生产的DH5α感受态细胞采用经特殊工艺处理得到,可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测,转化效率可达10^8cfu/μg。
基因型:supE44△lacU169(j80 lacZ△M15)hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1
特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其j80 lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的 b-半乳糖苷酶*基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。
操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45-90秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3分钟,该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀,吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收,倒置平板,37℃培养12-16小时。
注意:涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少,可通过离心(4000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)
注意事项:
1、感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免感受态细胞的转化效率。
2、进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3、为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。
储存条件:-70℃,有效期6个月。
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·快速银染试剂盒
编号:RFT055
英文名称:Fast Silver Stain Kit
规格:25次
本快速银染试剂盒是一种快速简单、可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染的试剂盒。本试剂盒也可以用于2D凝胶的银染,并且染色后兼容后续的质谱检测。本试剂盒只需约90分钟内可以完成凝胶的银染。对于BSA蛋白,检测灵敏度可以达到0.3ng蛋白。本试剂盒可足够用于25块常规的8×10cm凝胶的银染。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 贮存 |
| 银染增敏液(100×) | 26 ml | 常温 |
| 银溶液(100×) | 26 ml | 常温,避光 |
| 银染基本显色液(10×) | 250 ml | 常温 |
| 银染显色加速液(2000×) | 1.5 ml | 常温,避光 |
| 银染终止液(20×) | 125 ml | 常温 |
注意事项:
1、由于银染非常灵敏,操作时请注意尽量使用高纯度的水,并确保所使用的器皿非常清洁,最好使用洁净的玻璃器皿。操作时必须戴手套,避免皮肤和凝胶直接接触。
2、需自备乙醇、冰醋酸及MilliQ级纯水或双蒸水。
3、下述使用说明中各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶,各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大,对于更厚的凝胶,作用时间需按照厚度的比例适当延长。
4、本说明书所指的常温温为20-25℃,操作温度较低时由于溶液的扩散能力下降,各步骤需适当延长时间。
5、银染基本显色液(10×)在低温环境下可能会出现沉淀,可在30-37℃水浴中溶解,并充分混匀后使用。
储存条件:室温,有效期12个月。
DH5α化学感受态细胞优惠促销关键词:DH5α Competent cell,DH5α化学感受态细胞,RFT166
PY02-139 产毒培养基 250克
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F030202 HRP标记小鼠抗人IgG Fc抗体 Monoclonal Mouse Anti-Human IgG(FC)*HRP
PY04-018 西红柿浸出液 40ml/瓶 每瓶添加于100mlBBL琼脂培养基中,用于食品微生物中双歧杆菌的菌落计数及菌种鉴定
ARB10493 人白介素6(IL-6)酶联免疫定量检测 Human interleukin 6,IL-6 ELISA KIT
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海藻酸* Sodium Caprylate 9005-38-3
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9001-59-6 Pyruvic kinase 丙*(代"酮")酸激酶
5-硝基尿嘧啶 L-Methionine 611-08-5
PY02-393 SCHAEDLER(斯氏)琼脂 250克
亚硝基红盐 Gly-Gly-Val 525-05-3
F030212 HRP标记山羊抗兔IgG抗体 Goat Anti-Rabbit IgG*HRP
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N-羟基硫代琥珀酰亚胺 3-Bromopropylamine hydrobromide 106627-54-7
DH5α化学感受态细胞优惠促销关键词:DH5α Competent cell,DH5α化学感受态细胞,RFT166
HC0146 灭菌封瓶膜
4-甲基伞形酮酰-β-D-吡喃葡糖酸苷 Ceftazidime 18997-57-4
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BL1381 20×SSPE PH7.4
*甲蝶呤 M-PYROL 54-62-6
米吐尔 HSD 55-55-0
ARB10509 人白细胞介素2(IL-2)含量测试 Human interleukin 2,IL-2ELISA KIT
ARB13771 黄曲霉毒素(AFT)elisa检测说明书 aflatoxin,aft ELISA KIT
PY02-157 *甲*(代"酚")紫葡萄糖肉汤 250克
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文献和实验法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞:处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子):带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞,用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态,然后与 pUC18质粒共保温,实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因,因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性,用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释,在含氨
一、CaCl2 感受态细胞的制备的实验步骤 1.前夜接种受体菌( DH5α或 DH10B),挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜(约16小时); 2.取 1ml过夜培养物转接于100ml LB培养基中,在37℃摇床上剧烈振荡培养约2.5-3小时(250-300rpm); 3.将 0.1M CaCl2 溶液置于冰上预冷; 以下步骤需在超净工作台和冰上操作 4.吸取 1.5ml培养好的菌液至1.5ml离心管中,在冰上冷却10分钟; 5.
CaCl2 感受态细胞的制备的实验步骤1.前夜接种受体菌( DH5α或 DH10B),挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜(约16小时);2.取 1ml过夜培养物转接于100ml LB培养基中,在37℃摇床上剧烈振荡培养约2.5-3小时(250-300rpm);3.将 0.1M CaCl2 溶液置于冰上预冷;以下步骤需在超净工作台和冰上操作 4.吸取 1.5ml培养好的菌液至1.5ml离心管中,在冰上冷却10分钟;5.4℃下3000g冷冻离心5分钟;6.弃去上清,加入 100μl预冷
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