北京AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)价格

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北京AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)等基因结构和功能产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)价格
英文名：AFLP Kit(EcoRI-MseI)
编号：BTN100903
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：1600次
本产品在传统AFLP-PCR的基础上经过精心优化而开发。AFLP(amplified fragment length polymorphism)原理是一种结合RFLP和PCR技术特点的、迄今为止最有效分子标记分型技术，其原理如下：


产品特点：
1．一站式，足够50次酶切-连接反应、50次预扩反应和1600次AFLP PCR(PCR按30μL体系计算)，但不包括DNA 纯化和带型分析试剂(如PAGE电泳试剂和银染试剂)。
2．本系列产品提供EcoRI-MseI 组合，适用于GC含量在50%以上的基因组。对GC含量在50%以下的基因组，需从本公司采购AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3．各种参数都经过优化，一次PCR所得AFLP片段数一般在10-100之间，可重复性好，误差小于0.6%。
4．本产品适用于基因组在500 Mb-6000Mb的材料(如动物和植物)，对于基因组在50-500Mb的材料(如细菌和真菌)或50Mb以下的材料(如质粒，cosmid，BAC，YAC和PAC等)，需要分别另购专门的+1型预扩引物混合液和+3型EcoRI引物(8 种)AFLP引物对。

试剂盒组成：

 

成分	规格
酶切-连接Buffer，10×	100μl
EcoRI-MseI酶混合液	100μl
EcoRI-MseI 接头混合物	1ml
T4 DNA连接酶(1U/μL)	50μl
+0型预扩引物混合液	750μl
PCR Mix 3.0	9ml×3
对照DNA(50ng/μL)	20μl
+2型EcoRI引物(8条)	1ml每种
+3型MseI引物(8条)	1ml每种
TE溶液，pH8.0	10ml
超纯水	10ml
说明书	1份

+2型EcoRI引物和+3型MseI引物最后碱基的序列

引物名称	8条引物3´最后碱基
+2型EcoRI引物	-AA,-AT,-AG,-AC,-TA,-TT,-TG,-TC
+3型MseI引物	-CAA,-CAC,-CAG,-CAT,-CTA,-CTC,-CTG,-CTT

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：Southern级DNA纯化试剂，尿素-PAGE电泳套装，银染试剂盒。

使用方法：

一、DNA提取(本试剂盒不提供相关试剂)
用户需要自备50-500ng Southern级别的基因组DNA，用前最好预实验以确保DNA能够被EcoRI和MseI内切酶彻底切开。

二、限制性酶切和接头连接反应(本试剂盒足够50次本反应)
1．在0.2mL离心管中加入设置20μL的限制性内切酶酶切体系：

成分	用量
酶切-连接Buffer，10×	2μl
样品DNA	50ng(对小基因组材料) 500ng(对大基因组材料) 如果用对照，则用5μL
EcoR I-Mse I酶混合液	2μl
超纯水	加水到20μl

2．轻柔混匀并短暂离心后，37℃保温2小时酶切(若PCR 仪器不带热盖，则必须加50μL自备石蜡油，否则水分会蒸发影响反应。下同)，70℃保温15分钟灭活内切酶。
3．在上述酶反应体系中加入20μl EcoRI-MseI 接头混合物和1μl T4 DNA连接酶，轻柔混匀并短暂离心后，20℃保温2小时让接头跟DNA片段相连。
4．在一个离心管中加入10μl上步得到的连接反应液和90μL TE缓冲液，pH8，充分混匀，得到酶切-连接反应10倍稀释液，未用完的酶切-连接反应原液(30μL)可放-20℃保存。

三、预扩增(本试剂盒足够50次本反应)
5．在0.2mL离心管中设置30μl的PCR 体系：

成分	体积
酶切-连接反应液10倍稀释液	5μl
+0型预扩引物混合液	10μl
PCR Mix 3.0	15μl

6．离心数秒，按下列参数进行PCR预扩增：

	温度	时间
PCR(20次)	94℃	30s
	56℃	60s
	72℃	60s

7．可以取10μl PCR产物在1.5%琼脂糖胶上电泳检测，产物为100-1500bp 模糊条带。
8．将剩下的预扩反应液用TE 稀释50倍，直接用于下步反应或放-20℃保存待用。

四、选择性PCR扩增(本试剂盒足够至少1600次本反应)
9．在0.2mL PCR 管中，加入下列成分(如果用户已经知道哪个一种或几种引物组合适合自己的材料，则直接使用；如果不知道，则需要预先测试所有64 种组合，设置64个PCR反应)，下面只是一种组合：

成分	体积
预扩反应液50倍稀释液	5μl
+2型EcoR I引物之一(八种之一)	5μl
+3型Mse I引物之一(八种之一)	5μl
PCR Mix 3.0	15μl

10．轻柔混匀后离心数秒，按下列参数进行PCR：

	温度	时间
PCR(13次)	94℃	30s
	65℃	30s(每次循环递减0.7℃)
	72℃	60s
PCR(13次)	94℃	30s
	55℃	30s
	72℃	60s
延伸	72℃	5min

五、尿素-PAGE电泳和银染(需另购试剂并按相关说明书进行)

北京AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)价格正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
编号：BTN140431
英文名称：E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本产品适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定复制，还适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达108。本感受态细胞具有四环素和*霉素抗性。

菌株基因型：Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr)Amy Camr]

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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·革兰氏阳性菌质粒DNA提取试剂盒
编号：BTN120601
英文名称：Gram-positive bacteria plasmid DNA extraction kit
规格：50次

·Tricine-SDS PAGE上样液
编号：BTN81213
英文名称：Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer
规格：1mL
本产品是专门用于Tricine-SDS-PAGE电泳样品上样用的缓冲液，其浓度为2×，配胶时即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·冷冻型血液RNA保存液
编号：BTN130969
英文名称：Blood RNA freezing preservation solution
规格：100mL
本产品是专门用于Tricine-SDS-PAGE电泳样品上样用的缓冲液，其浓度为2×，配胶时即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·一管式病毒DNA提取试剂盒
编号：BTN3674
英文名称：One-tube virus DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取病毒(如HBV)DNA的产品，其原理是异硫*酸胍/LiCl溶液即能裂解病毒，又能沉淀DNA。本产品灵敏度高，稳定性好，使用简单快捷，尤其适合于整合到临床PCR 检测试剂盒中。

试剂盒特点：
1. 回收率高，可以达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到的最终灵敏度可以达到30-50 拷贝/mL。
3.一管式操作，不使用离心柱，整个操作过程均在室温下完成。
4. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
5.处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
6.与PCR和荧光PCR 兼容。

试剂盒组成：

成分	规格
病毒DNA提取试剂	30ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1.在1.5mL 螺旋盖塑料离心管(最好不要使用压盖式塑料离心管)中加入0.1-0.2mL液体样品。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体在4℃ 24,000g 冷冻离心60分钟，移弃1.3mL后继续操作。
2. 加入0.6mL 病毒DNA提取试剂盒溶液，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。
3. 振荡30秒混匀后加入0.7mL 异丙醇，振荡30秒混匀后，15000g室温离心15分钟。
4. 移弃上清，注意不要触及管底的DNA沉淀，加入1.0mL 70% 乙醇，振荡数秒后 15000g室温离心5分钟。
5. 移弃上清，注意不要触及管底的DNA沉淀。再短暂离心数秒，移弃残留上清(残留的乙醇会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀,加入200μl超纯水，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象，如果溶于200μL 水而样品使用量不超过PCR 体系的1/2时，不溶物一般不会影响后续PCR反应。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有DNA，必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
6.样品可以直接取适量用于PCR，也可保存于-20℃长期保存。

使用效果：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000 拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl 水中，取5μl进行荧光PCR(使用MJResearch的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。


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BL0632 Q-琼脂糖凝胶HP Q Sepharose HP
高纯度质粒小提中量试剂盒 
CYB168004 标准新生牛血清 100ml/瓶
ARB12250 大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)Elisa方法检测 Rat angiotension Ⅰ,ang-Ⅰ ELISA KIT
红藻*酸 Januˊs green B 58002-62-3
BL0777 基底胶9.6mg/ml
DN0101 小量全血基因组DNA快速提取试剂盒(溶液型)
二乙酸萤光素 L-Cysteine 596-09-8
F030619 FITC标记兔抗鸡IgY抗体 Rabbit Anti-Chicken IgY*FITC
D0401 脱纤维马血(无菌 pet瓶装) 100ml/200ml/500ml
柠檬酸—柠檬酸*缓冲液(10mmol/L,pH6.0)   500ml
ARB11002 人补体1抑制物抗体(C1INH)elisa测定使用说明书 Human complement 1 inhibitor autoantibody,c1inh ELISA KIT
ARB12039 大鼠一氧化*(代"氮")合成酶(NOS)Elisa定量检测 Rat nitric oxide synthase,nos ELISA KIT
9036-06-0 PronaseE  链霉蛋白酶E
F030427 胶体金标记兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY*GOLD
BTN131083 Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒 Ribo-SPIA RNA Amplification Kit
十二烷基三甲基*化铵 4-NPP 112-00-5
ARB10782 人抗子宫内膜抗体(EMAb)检测服务 Human endometrium antibody,emab ELISA KIT
ARB14260 大鼠丛状蛋白A1(PLXNA1)定量分析 

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