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pRT20-T vector
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北京百奥莱博科技有限公司
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货pRT20-T载体克隆试剂盒(国产,进口)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多pRT20-T载体克隆试剂盒等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货pRT20-T载体克隆试剂盒(国产,进口)
英文名:pRT20-T vector
编号:RFT110
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
pRT20-T 载体是一种高效克隆PCR产物(TA Clonging)的专用载体。它是由pUC19载体改造成的(pRT20-T载体在pUC19质粒MCS位点附近插入T7启动子序列),MCS位点经过EcoR V酶切后在两侧的3’端添加”T”制备而成。因大部分Taq酶会在PCR产物的3’末端添加一个“A”,所以用本载体可以高效地进行PCR产物克隆。
试剂盒组份:
内容 | 浓度 | 总量 |
pRT20-T vector | 25 ng/μl | 20μl×1支 |
2×ligation solution | - | 150μl×1支 |
Control insert(700bp) | 12.5 ng/μl | 10μl×1支 |
M13F(-47) | 10μM | 20μl×1支 |
M13R(-48) | 10μM | 20μl×1支 |
Water(RNase-free,DNase-free) | - | 1ml×1支 |
成分 | 体积 | 终浓度 |
Template | 0.1-1μg | as you wish |
Primer 1(10μM) | 1μl | 200nM |
Primer 2(10μM) | 1μl | 200nM |
10×Taq plus PCR buffer | 5μl | 1× |
dNTP Mixture(10 mM) | 1μl | 200μM each |
Taq plus(5 U/μl) | 0.5-1μl | 2.5-5U |
ddH2O | up to 50μl | - |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
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