BTN160684-25K型SuperTOPO-Kan平末端

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北京百奥莱博供应的BTN160684-25K型SuperTOPO-Kan平末端克隆试剂盒厂家用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多SuperTOPO-Kan平末端克隆试剂盒等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：BTN160684-25K型SuperTOPO-Kan平末端克隆试剂盒厂家
规格：25次
编号：BTN160684-25K
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：SuperTOPO Blunt Cloning Kit
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
5. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160684-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
SuperTOPO-Amp Blunt载体	25μl(BTN160684-25A)
SuperTOPO-Kan Blunt载体	25μl(BTN160684-25K)
连接缓冲液	25μl
M13F引物	50μl
M13R引物	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160684-25A提供SuperTOPO-Amp Blunt载体，BTN160684-25K提供SuperTOPO-Kan Blunt载体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 如果是PCR 制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用pfu、KOD等产生平末端片段的高保真DNA聚合酶。为保证扩增产物的完整性，PCR循环结束后，再延伸5-10分钟，确保片段延伸完全。
2.电泳检测并相对定量PCR片段(跟DNA marker 比较)。根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50 ng
1000-2000bp	50-100 ng
2000-5000bp	100-200 ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp Blunt载体或 SuperTOPO-Kan Blunt载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL 刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5×10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL 不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μl 不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL 涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-AmpBlunt载体)或Kan(对SuperTOPO-Kan Blunt载体)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用M13F/M13R通用引物进行菌落PCR或直接测序来鉴定重组子。

想要了解更多关于BTN160684-25K型SuperTOPO-Kan平末端克隆试剂盒厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
HC0192 记号笔(红色) 油性
PY08-066  PH7.0*化*蛋白胨缓冲液 225ml  20瓶/箱，用于样品的稀释液
6-*-1-羟基*并三氮唑 dCMP 26198-19-6
Clarke固定液   500ml
J0303 兔抗猪IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB10864 人抗核小体抗体IgG(AnuA-IgG)Elisa分析 Human anti-nucleosome antibody igg,anua-igG ELISA KIT
细胞分离液 XTT sodiu*(代"m") salt
ARB12618 大鼠蛋白激酶C(PKC)酶联免疫定量检测 Rat protein kinase c,pkc ELISA KIT
三异戊胺 Moxifloxacin 645-41-0
5-鸟苷一磷酸二*盐 H-Phe-OMe?HCl 5550-12-9
NF-226 羊抗人全血清
F030223 HRP标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*HRP
Earle"s平衡盐粉剂(无**糖酚红)  1×EBSS 1L|10×1L
9004-67-5 Methyl Cellulose  甲基纤维素
F010205 小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG
*肽酶抑制剂盐*(代"酸")盐 2,6-Diisopropylphenol 100938-10-1
PY02-018  克氏双糖铁琼脂  250克  
HC0033 Transwll 聚碳酸酯膜嵌套5.0um
BL1222 0.4% TTC染色液
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ARB10927 人极低密度脂蛋白受体(VLDLR)ELISA检测服务 Human very low density lipoprotein receptor,vldlr ELISA KIT
ARB12967 小鼠全段甲状旁腺素(I-PTH)代做ELISA实验 Mouse intact paRathormone ,i-pth ELISA KIT
ARB13850 猪内皮素1(ET-1)尿液中含量检测 Porcine endothelin 1,et-1 ELISA KIT
ARB14261 人丛状蛋白A1(PLXNA1)Elisa分析 
马铃薯淀粉 Sodium bromide 9005-25-8
ARB12607 大鼠脱*表雄酮S7(DHEA-S7)酶联免疫定量检测 Rat dehydroepiandrosterone s7,dhea-s7 ELISA KIT
BTN100602 干粉型LB培养基 LB Medium Powder
SJ0648 Olig(dT)15
ARB12716 大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)酶免分析 Rat phosphotylinosital 3 kinase,pi3k ELISA KIT
BL1140 BL21(DE3)pLysS受体菌
头孢噻*(代"吩")* Lactobionic acid 58-71-9
ARB13038 小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)尿液中含量检测 Mouse complement 1 inhibitor autoantibody,c1inh ELISA KIT
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·HRP标记亲和素
编号：BTN131086
英文名称：HRP-Avidin
规格：2mg
本产品为辣根过氧化物酶标记的亲和素干粉，每摩尔亲和素含有1-2mol辣根过氧化物酶，结合能力为5-10μg生物素/mg蛋白≥80过氧化物酶单位/mg蛋白。本品常用在内源磷酸酶会对实验造成影响的免疫组化中使用以及免疫印记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·磷酸化蛋白纯化试剂盒
编号：BTN130883
英文名称：Phosphorylated proteins purification kit
规格：50次
本产品为辣根过氧化物酶标记的亲和素干粉，每摩尔亲和素含有1-2mol辣根过氧化物酶，结合能力为5-10μg生物素/mg蛋白≥80过氧化物酶单位/mg蛋白。本品常用在内源磷酸酶会对实验造成影响的免疫组化中使用以及免疫印记。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·AP标记亲和素
编号：BTN131087
英文名称：AP-Avidin
规格：100mg
本产品为碱性磷酸酶标记的亲和素，SDS-PAGE检测均一性。每mol亲和素含有大约1mol碱性磷酸酶。

产品应用：
1．在内源过氧化物酶会对实验造成影响的免疫组化中使用；
2．免疫印记；
3．酶联免疫吸附试验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性单位定义：1单位表示在37℃，pH9.5情况下，每分钟从对硝基酚磷酸盐释放1.0μmol对硝基酚。

·T7 DNA聚合酶(未修饰)
编号：BTN130618
英文名称：T7 DNA Polymerase(Unmodified)
规格：300U
T7 DNA聚合酶催化在感染过程中T7噬菌体DNA的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性，DNA聚合酶活性和较强的3´→5´核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率，因而特别适于长链DNA模板的复制。T7 DNA聚合酶由两个亚基组成，T7基因5蛋白(80kDa)和E.coli硫氧还蛋白(1kDa)。这两个蛋白分别克隆并在E.coli的T7表达系统过表达。

产品特点：
1．缺口填充(无链置换活性)。
2．定点突变中第二链的合成。
3．具有快速延伸的特性，故无需长时间温育。
4．T7 DNA聚合酶不能用于DNA测序。

产品组成：

成分	规格
T7 DNA聚合酶(10U/μL)	30μl
10×T7 DNA聚合酶反应缓冲液	1.5ml
BSA溶液(10mg/mL)	0.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：对于不同的实验，各成分用量及反应时间可能不同，请根据具体实验具体调整。1×T7 DNA聚合酶反应缓冲液，加入0.05mg/mL BSA和自备的dNTPs，37℃温育。

热失活：75℃下反应20分钟。

单位定义(粘性末端活性单位)：1 单位指在37℃条件下反应30分钟，能使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物中所需的酶量。

贮存液成分：50mM KPO4，1mM DTT，0.1mM EDTA，50%甘油，pH7.0@25℃。

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