Bsu DNA聚合酶，大片段促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

Bsu DNA聚合酶，大片段促销的品牌：百奥莱博，是优质的工具酶产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Bsu DNA聚合酶，大片段等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：Bsu DNA聚合酶，大片段促销
品牌：百奥莱博
英文名：Bsu DNA Polymerase，Large Fragment
产地：国产|进口
编号：BTN130616
规格：200U
Bsu DNA聚合酶大片段保留了Bacillus subtilis DNA聚合酶I的5´→3´聚合酶活性，但是缺失了5´→3´外切酶结构域。大片段缺乏3´→5´外切酶活性。

产品用途：
1．DNA等温扩增；
2．引物延伸；
3．80℃ 20分钟即可失活；
4．建议反应温度不要超过70℃，不能用于热循环测序或PCR。

产品组成：

 

成分	规格
Bsu DNA聚合酶，大片段，5000U/mL	0.04ml
反应Buffer，10×	1.25ml
说明书	1份

活性单位定义：1单位指37℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

储存Buffer：25mM Tris-HCl(pH7.4)，50mM NaCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，50% Glycerol。

反应条件：1×Buffer[10mM Tris-HCl，50mM NaCl，10mM MgCl2，1mM DTT(pH7.9 @ 25℃)]。加入33μm dNTPs(不随酶提供)，37℃孵育。

灭活：75℃ 20分钟。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

备注：
1．由于缺乏3´→5´核酸外切酶活性，Bsu DNA聚合酶大片段不能切除3´未配对的突出末端，因而不适用于生成平滑末端；
2．25℃时，Bsu DNA聚合酶，大片段保留50%的活性，是同温度下Klenow片段(3´→5´exo–)的两倍。

除Bsu DNA聚合酶，大片段促销外，我公司正在打折促销以下产品：

·血液RNA提取试剂盒
编号：BTN3071
英文名称：Blood RNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒是专门从全血样品中快速提取总RNA的试剂盒，主要用于提取全血细胞的总RNA(提取血浆病毒RNA 需使用病毒RNA提取试剂盒，提取纯化后的白细胞RNA可使用动物RNA提取试剂盒)。

试剂盒特点：
1. RNA 无明显降解和DNA污染，OD260/280 均在1.9以上。血液RNA的产量与动物种类和动物的状态(如有疾病与否)有很大关系，人全血产量为2-6μg/mL，兔全血产量为5-10μg/mL。
2. 操作简单，直接使用新鲜的或冷冻的抗凝全血样品，不需裂解红细胞等任何预处理步骤，整个提取过程只需要十多分钟，可以全在室温下进行。
3.处理量大，每管的样品处理量可以达到1.5mL，高于进口的同类产品。
4.与常用的抗凝剂(包括肝素，EDTA，柠檬酸*，草酸*)兼容，得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern杂交等研究。

试剂盒组成：

成分	50T
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	25ml
溶液D	25ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，溶液B和溶液C有腐蚀性。4℃保存的溶液A可能会产生白色沉淀，用前需65℃水浴加热直到沉淀溶解。有效期一年。

使用方法：
1. 将0.2-1.5mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中，15000g室温离心3分钟，弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL，则需要减少血液的使用量，具体减少量需根据具体情况决定，因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。如果提取0.1mL以下的微量血液样品最好加入百奥莱博的微量助沉剂RNApp。
2. 将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中，用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
3. 将0.3mL的溶液B和0.2mL *仿加入离心管，剧烈震荡30秒。
4. 13000-15000g室温离心5分钟，将上清液(为无色或浅红色，约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。为防止污染，最好留100μl左右的上清液。下层有机相一般呈深红色，中间层为白色，含有DNA，蛋白质和其他细胞破碎物，避免触及或吸取。
5. 加入0.5mL的溶液C和0.2mL的*仿到上清液中，用手上下剧烈摇晃30秒。
6. 13000-15000g室温离心3分钟，将上清液(无色，约1mL)转移到另一干净离心管中，避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物(蛋白质)。可以按每次吸取100-200μl的方式分批转移。
7.在上清液中加入1/2 体积的溶液D，用手上下剧烈摇晃30秒，溶液将呈白色浑浊状。
8. 13000-15000g室温离心5-30分钟，小心移弃上清液，避免触及管底大量的白色RNA沉淀。
9.在离心管中加入1mL 75%乙醇，振荡器上振荡混均30秒。室温离心13000-15000g 1分钟，RNA 此时在管底形成细小沉淀。小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
10. 重复第9 步的75%乙醇清洗步骤一次。
11. 短暂快速离心数秒使管壁上残留液体沉到管底(约50μl)，用移液枪小心吸弃，注意不要吸弃沉淀。此步十分重要，因为残留的乙醇会影响后续反应。
12.室温短暂放置2分钟，立即加入适量(一般为10-30μl)溶解液使RNA沉淀溶解。建议使用具有灭活残留RNase 功能的新型RNA 溶解液液相RNase Scavenger 而不要使用经典的DEPC 水。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA将变得十分难溶。RNA样品可以直接使用，也可以存放于-80℃长期保存。

疑难解答：
1．有的样品在第4 步离心后有很厚的中间层，上清很少。原因是蛋白质变性不充分，可以适当减少血液的用量。白细胞多的血液容易产生这种情况。
2．有的样品在加入溶液D离心后，沉淀上浮在液面，这是由于液体的比重大于沉淀，可以加入少量的超纯水使溶液的比重降低，直到沉淀能下去为止。也可能把下层的有机相取上来了，如果这样需要重做。
3．千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则将变得十分难溶。
4．无论使用甲醛变性胶还是非变性胶电泳时，一定要使用RNA变性/上样液(如百奥莱博的RNAload)以让RNA 充分变性，否则加样孔中会有RNA复合物(人们会误以为是DNA污染)。使用没有变性能力的DNA上样液不能使RNA 复合物分离。
5．测OD时一定要使用pH8.0的缓冲液(如TE)，不要使用微酸性的DEPC水，否则OD 值会比真实的值低15-20%。


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·动物细胞裂解液B(变性)
编号：BTN80807B
英文名称：Animal Cell Lysis Solution(B)
规格：100mL
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。

产品特点：
1.快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能最大程度地保留蛋白天然结构和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高，主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验，还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

注意事项：
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物，可以更有效地抑制蛋白酶活性，防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究，最好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

使用方法：

一：处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液，用冰浴预冷的PBS 洗两遍，去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
 注意：裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1～2×106细胞)需要0.1～0.2mL本产品；25 cm2培养瓶(3～6×106细胞)需要0.3~0.6mL；75 cm2培养瓶(1～2×107细胞)需要1～2mL。对于特别大或特别小的细胞，需要用户摸索最佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(最佳时间跟细胞系相关)，其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端，并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
7. 用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

二：处理悬浮细胞
1. 400×g，4℃离心10分钟收集悬浮细胞，弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍，步骤同第一步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品，充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞，期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀，最好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
7. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

三：处理组织块
1. 称量组织块，用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆，用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中，1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品，吹打混匀，放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次，共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。
6. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。


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蛋白酶抑制剂混合液  100×PIC 1ml
F020236 兔抗人IgGxIgMxIgA抗体 Rabbit Anti-Human IgGxIgMxIgA
ARB11157 人周期素依赖性激酶4(CDK-4)含量测试 Human cyclin-dependent kinase 4,cdk-4 ELISA KIT
F030109 HRP标记羊抗乙肝e抗原抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-HBeAg
ARB10546 人皮质酮(CS)含量检测 Human corticoserone ,cs ELISA KIT
ARB10972 人免疫球蛋白G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)Elisa定量检测 Human receptor Ⅲ for the fc region of immunoglobulin g,fcγrⅢ ELISA KIT
ARB11471 人胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)酶标法分析 Human insulin-like growth factors 1，igf-1 ELISA KIT
BL1342 PH值标准液(PH4.01)
肽酶 Tungstic acid
BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒   50ml
1409-69-2 亲和素 Avidin
ARB13059 小鼠肾上腺髓质素(ADM)含量测试 Mouse adrenomedullin,adm ELISA KIT
ARB10673 人血管紧张素Ⅳ(ANGⅣ)酶标法分析 
ARB14005 鹿血清淀粉样蛋白A(SAA)酶免分析 Deer serum amyloid a,saa ELISA KIT
PY02-359  沙氏葡萄糖琼脂培养基  250克  

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