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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Bsu DNA Polymerase, Large Fragment
- 供应商:
默瑞生物
- 规格:
250U
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文献和实验vol 687 Chapter 2 采用DNA聚合酶融合技术进行长片段PCR扩增 (精华)
genomic DNA, as well asPCR primer sequences for an 18.4 kb b-globin fragment that canbe used to optimize long-range PCR procedures in individuallaboratories (Fig. 1). Fig. 1. Optimization parameters for long PCR with a DNA polymerase fusion
中若有任何一条逢机引子结合到模版DNA,即可引导DNA聚合反应的进行。 以random priming方法进行核酸标定,是以逢机引子引导Klenow fragment(large fragment of E. coli DNA polymerase I) 进行DNA聚合反应,并在反应过程中添加 [α-32P]dNTP或DIG-11-dUTP等标定物质。 而为了避免random priming也发生于载体部份的DNA,最好不要直接以质体DNA为模版进行标定反应,而应预先将目标DNA自载体切除
仪达到变性温度。包括延缓加入Taq DNA聚合酶,在反应体系达到90度时,PAUSE,将温度保持在70度以上,手工加入polymerase,但这个方法过于烦琐, 尤其是对高通量应用,并容易造成污染。其他的热启动方法使用蜡防护层将一种基本成分,入镁离子或酶,包裹起来,或者将反应成分,如模板和缓冲液,物理地隔离开。在热循环时,因蜡熔化而把各种成分释放出来并混合在一起。有很多公司提供这样的酶。 ======================= ampliwax PCR Gems (Perkin
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