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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
838
- 英文名:
Bst DNA Polymerase,Large Fragment
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应大片段Bst DNA聚合酶打折促销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:大片段Bst DNA聚合酶打折促销
编号:BTN100209
规格:800U
英文名:Bst DNA Polymerase,Large Fragment
品牌:百奥莱博
Bst DNA聚合酶大片段是将缺少5´→3´外切核酸酶结构域的Bacillus stearothermophilus(嗜热脂肪芽孢杆菌)DNA聚合酶基因在E.coli中表达纯化而得。
产品特点:
1. 5´→3´DNA聚合酶活性,但不具有5´→3´外切核酸酶活性,因此没有纠错功能。
2. 嗜温性,最适反应温度为68℃,建议反应温度不要超过70℃。
3. 强链置换能力,可以用于DNA链置换反应和LAMP扩增。还可用于68℃DNA测序(该条件尤其适用于富含GC的模板和纳克级的模板)。
4. 不能用于热循环测序或PCR,80℃ 10分钟即可失活。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| Bst DNA聚合酶(8U/μL) | 100μl |
| 10×Bst Buffer | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存、有效期一年。长期贮存需补加100μg/mL BSA或0.1% Triton X-100。
1×Bst DNA聚合酶Buffer的组成:20mM Tris-HCl(pH8.8 @ 25 ℃),10mM KCl,10mM(NH4)2SO4,2mM MgSO4,0.1% Triton X-100
活性定义及检测条件:1 U 指65℃条件下,30分钟内使10nmoL的dNTP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。活性检测条件为:50mM KCl,20mM Tris-HCl(pH8.8),10mM MgCl2,30 nM M13mp18 ssDNA,70 nM M13 测序引物(-47)24 mer,200μm dATP,200μm dCTP,200μm dGTP,100μm[3H] dTTP,100μg/mL BSA和酶,65℃温育。
贮存条件:50mM KCl,10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,0.1mM EDTA,0.1% Triton X-100和50%甘油,贮存于-20℃。
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大片段Bst DNA聚合酶打折促销关键词:大片段Bst DNA聚合酶,Bst DNA Polymerase,Large Fragment,BTN100209
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大片段Bst DNA聚合酶打折促销关键词:大片段Bst DNA聚合酶,Bst DNA Polymerase,Large Fragment,BTN100209
·木材DNA提取试剂盒
编号:BTN130941
英文名称:Timber DNA extraction kit
规格:50次
·大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
编号:BTN140431
英文名称:E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本产品适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定复制,还适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达108。本感受态细胞具有四环素和*霉素抗性。
菌株基因型:Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr)Amy Camr]
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
北京百莱博科技有限公司专业生产工具酶产品,欢迎来电咨询选购大片段Bst DNA聚合酶打折促销。
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文献和实验keimon 要对MUT基因缺失的病进行检查,检测对象是个携带者,怀疑是大片段DNA缺失,求大片段外显子缺失的检查方法? :D woxingwosu 呵呵,虽然不熟悉,我也来说说看法。 是否可以通过PCR基因组来判断呢?设计一对引物,其中一个引物要在这个大片段上面,然后从对象提取基因组,做PCR,再与正常的基因组比较得到差异? 或者是通过提RNA,RT-PCR,最后在用这一对引物去检测与正常的差别
Bst-catalyzed radiolabeled DNA sequencing
Bst DNA polymerase-catalyzed radiolabeled two-step sequencing reactions are modified from those presented earlier by altering the absolute amounts and the relative deoxy/dideoxynucleotide ratios in the termination mixes
一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性 通常所用的PCR方法都在两个方面有局限,即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus furiosus)DNA聚合酶,具有完整的3‘外切酶校读活性(3'-editing-exonuclease),可以将每个循环中碱基的错配率由10*-4降到10*-3,从而提高PCR产物的准确性。但它在扩增1.5-2.0 kb 片段时,效率比Klentaq l(Taq DNA聚酶N-末端缺失突变体,类似于E.coli DNA聚合酶
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