SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒北京价格

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百奥莱博专业生产销*(代"售")SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒北京价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒北京价格
规格：25次
产地：国产|进口
英文名：SuperTOPO TA Cloning Kit
品牌：百奥莱博
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于具有A 尾巴的DNA片段使用。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4.转化时只需要37℃,10分钟复苏即可涂盘，免去冰浴、热休克和复苏步骤。
5. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
6. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
7. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160686-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160686-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
SuperTOPO-Amp载体	25μl(BTN160686-25A)
SuperTOPO-Kan载体	25μl(BTN160686-25K)
连接缓冲液	25μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160686-25A提供SuperTOPO-Amp载体，BTN160686-25K提供SuperTOPO-Kan载体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. PCR扩增或酶切回收DNA插入片段。如果是PCR制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用Taq系列的DNA聚合酶。
2.电泳检测并相对定量PCR片段或酶切回收片段(跟DNA marker比较)。
 并根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50ng
1000-2000bp	50-100ng
2000-5000bp	100-200ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp载体或 SuperTOPO-Kan载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

 注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5﹡10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μL不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用菌落PCR、直接测序或其他方法鉴定重组子。

更多有关SuperTOPO-Kan TA克隆试剂盒北京价格的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
*化*(代"*")-EDTA溶液(0.15mol/L)   100ml
天青Ⅰ Guanine 531-55-5
ARB10759 人抗BB抗体(BB-Ab)酶标法分析 Human anti-b burgdorleri antibody,bb-ab ELISA KIT
葡聚糖凝胶G-10 Syringaldehyde 9050-68-4
N-(2-羟yi基)哌*(代"嗪")-N-乙磺酸*盐 PHBA 75277-39-3
Acr-Bis(30%:1.8%)   500ml
ARB12070 大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)Elisa方法检测 Rat neutrophil gelatinase-associated lipocalin,ngal ELISA KIT
BTN131039 即用型EMSA试剂盒 EMSA Kit
ARB10622 人血栓调节蛋白(TM)ELISA代测服务 Human thrombomodulin,tm ELISA KIT
ARB13764 鸭白介素8(IL-8/CXCL8)检测服务 Duck interleukin-8,IL-8 ELISA KIT
丁烷磺酸* Cremophor EL 2386-54-1
ARB11833 人整合素连接激酶1(ILK-1)酶标法分析 Human integrin-linked kinase 1,ilk-1 ELISA KIT
ARB11699 人硫*(代"酸")类肝素(HS)Elisa方法检测 Human heparan sulfate,hs ELISA KIT
PY08-055  山梨醇麦康凯琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于肠出血性大肠杆菌O157：H7的分离培养
F030434 胶体金标记山羊抗人IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*GOLD
ARB11610 人脱氧尿三磷酸(DUTP)elisa检测说明书 Human deoxyuridinetriphate,dutp ELISA KIT
ARB10329 人内毒素(ET)含量测试 Human endotoxin,et ELISA KIT
585-99-9 蜜二糖 Melibiose
柠檬酸盐脱*液   500ml
DP304 血液组织细胞基因组提取试剂盒
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·AEBSF溶液(10mg/mL)
编号：BTN130544
英文名称：AEBSF Solution
规格：5mL
本产品为浓度是10mg/mL的AEBSF水溶液，工作浓度为0.1-1.0mg/mL。4-(2-*乙基)*磺酰*盐*(代"酸")盐(4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochloride，Pefabloc SC)，分子量是239.5，溶于水，无毒，在低pH条件下，比PMSF更稳定。它是一种水溶性的不可逆的丝*酸蛋白酶，可以抑制胰凝乳蛋白酶，激肽释放酶，血纤维蛋白溶酶，凝血酶和胰蛋白酶。


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期3个月。

·沉淀型TMB显色试剂盒
编号：BTN101106
英文名称：Precipitated TMB Chromogenic Kit
规格：100mL
TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方，辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物，适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学，以及原位杂交染色等。即开即用，性能稳定，操作便捷，敏感度高，显色清晰，重复性好。

产品特点：
1．相对于DAB来说，灵敏度高。
2．色泽稳定，无须避光显色。
3．色带为蓝色，便于观察。
4．无毒环保，可以放心使用。

产品组成：

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期一年。

使用方法：

一、免疫印迹染色
1．准备好含有待测蛋白的固相膜：包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
2．加入1滴溶液A和1滴溶液B，铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3．置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2-5分钟，直至深蓝色沉淀出现。
4．用镊子夹起固相膜，放入去离子水中清洗。
5．空气中晾干。
6．拍照记录。

二、免疫化学染色
1．准备好含有待测蛋白的组织切片：包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
2．加入1滴溶液A和1滴溶液B，铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3．室温下，小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
4．室温下孵育5-10分钟，或直至样本出现深蓝色。
5．小心移去切片上显色工作液。
6．室温下，小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
7．小心移去切片上的PBS缓冲液。
8．放上盖玻片或封片。
9．(选择步骤)进行甲基绿复染。
10．立即在一般光学显微镜下观察：阳性呈现深蓝色。

注意事项：
1．加入1滴溶液A和1滴溶液B，可按比例增减
2．如果封闭欠佳，易造成背景颜色过深
3．固相膜显色后数小时将会褪色，不能永久存在。
4．该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
5．染色后可用甲基绿或苏木素复染，增强对照。

疑难解答：
Q：在ELISA底物反应过程中，为何有些孔呈蓝色，而另外的孔呈蓝绿色？
A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象，不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的，建议降低二抗的浓度。
Q：ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀？
A：HRP浓度过高，建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
Q：如何降低背景读数？
A：建议降低一抗或二抗浓度，延长封闭时间。


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F030617 FITC标记兔抗狗IgG抗体 Rabbit Anti-Dog IgG*FITC
BTN81206 *基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain
对羟基*丙*(代"酮") o-Cresolphthalein 70-70-2
ARB13001 小鼠抗利尿激素/血管加压素/精*酸加压素(ADH/VP/AVP)含量测试 Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin,adh/vp/avp ELISA KIT
BL0891 兔抗HRP免疫血清
ARB13179 小鼠透明质酸(HA)含量检测 Mouse hyaluronic acid,ha ELISA KIT
ARB12422 大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)Elisa定量检测 Rat muscarinic acetylcholine receptor,m-achr ELISA KIT
ARB11954 大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA代测服务 Rat collagen type Ⅱ,col Ⅱ ELISA KIT
62758-13-8 Resazurin sodiu*(代"m") salt刃天青
F030810 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgM抗体 Goat Anti-Mouse IgM*BIOTIN
活化凝血时间(ACT)检测试剂盒(凝固法)   50T
BTN131183 链激酶 Streptokinase
对*基*磺酰胺 Metol 63-74-1
ARB11310 人促肾上皮质激素释放激素(CRH)elisa测定使用说明书 Human corticotropin releasing hormone,crh ELISA KIT
BL1253 1kb plus DNA Ladder

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