酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达

酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达

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  • ¥140 - 1870
  • 百奥莱博
  • BTN140388-KZU
  • 北京
  • 2025年07月15日
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      957

    • 英文名

      E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      干冰运输

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达
    产地:国产|进口
    编号:BTN140388
    英文名:E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell
    品牌:百奥莱博
    规格:10×100μL
     NMY51感受态细胞是膜系统酵母双杂宿主菌,本产品经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA 。

    基因型:MAT a his 3Δ200 trp 1-901 leu 2-3,112 ade 2 LYS2::(lex Aop)4-HIS 3 ura 3::(lex Aop)8-lac Z ade 2::(lex Aop)8-ADE 2 GAL 4

    储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。

    想要了解更多关于酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
    ARB13908 猪血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)elisa检测操作说明书 Porcine vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
    每支添加于100ml马铃薯葡萄糖琼脂培养基基础中。,用于酵母菌、霉菌的计数"
    *甲*(代"酚")绿-甲基橙指示剂   100ml
    BL0886 兔抗马IgG免疫血清 0.5ml
    ARB11227 人细胞周期素D1(CyclIn-D1)elisa检测操作说明书 Human cyclin-d1 ELISA KIT
    NF-249 冻干羊抗人C5血清
    P:C:I(25:24:1,pH﹤5.0)   100ml
    ARB11633 人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)Elisa分析 Human lymphocyte function associated antigen 3,lfa-3 ELISA KIT
    BTN60607 液相内毒素清除剂 Solution Endotoxin Erasol
    J0206 兔抗乙肝核心抗原抗血清 1ml/10ml
    PY02-011  乳糖蛋白胨培养基  250克  
    红霉素溶液(50mg/ml) Erythromycin 50mg/ml 10ml
    F030219 HRP标记兔抗鸡IgY(IgG)抗体 Rabbit Anti-Chicken IgY*HRP
    ARB13370 牛活化素(ACV)elisa检测 Bovine  activin a,acv ELISA KIT
    F050101 辣根酶标记盐*(代"酸")克伦特罗 HRP*Clenbuterol
    二甲*青FF溶液(2.5%)   10ml
    CYB161030 大鼠IgG(液体-pH7.2PBS)
    BL0913 FITC标记人IgG抗体
    酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达关键词:BTN140388,酿酒酵母NMY51感受态细胞,E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell


    ·大肠杆菌Rosetta感受态细胞
    编号:BTN140379
    英文名称:E.coli Rosetta Competent Cell
    规格:10*100μl
     本产品为采用大肠杆菌Rosetta菌株经特殊工艺处理得到的大肠杆菌化学感受态细胞,具有*霉素抗性,补充大肠杆菌缺乏的6 种稀有密码子(AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA)对应的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系统中的表达水平,经 pUC19质粒检测转化效率高达 109cfu/μg。

    基因型:F- omp T hsd SB(rB- mB-)gal dcm pRARE(CamR)

    储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。

    ·耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)
    编号:BTN131210
    英文名称:Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-)
    规格:10000U
    本产品为点突变型M-MLV逆转录酶(RNase H缺失),拥有RNA和DNA聚合酶活性,但由于在RNase H结构域内进行了点突变,该酶缺少RNase H的活性,不会降解第一链CDNA 合成时形成的RNA-DNA 复合物中的RNA,从而可以从长模板中获得高产量的全长cDNA。缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。

    产品特点:
    1.温度稳定性,点突变产物的热稳定性可防止与二级结构相关的问题,增强了与模板的亲和力。
    2.能够在较宽的温度范围内保持活性,在42-45℃之间具有最佳活性,在温度高达55℃时仍有活性。
    3.聚合酶活性增强,本产品与其它缺失突变得到的M-MLV 逆转录酶相比,具有更高的cDNA产率。
    4.高产量制备全长的第一链cDNA,最长可达13kb。合成时可掺入带有修饰的核苷酸(例如 Cy3-、Cy5-、罗丹明-、*基烯丙基-、荧光素-标记的核苷酸)。
    5.广泛的工作范围:提高了逆转录的性能,使得可以在更广泛的酶浓度和底物浓度的条件下工作。

    产品组成:

     
    成分 规格
    耐热型MMLV逆转录酶(H-),200U/μL 50μl
    5×RT Buffer 1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.在无RNase的PCR管中加入如下成分:
    成分 用量
    ▶RNA模板
    Total RNA
    或poly(A)RNA
    或specific RNA
    0.1ng-5μg
    10pg-500ng
    0.01 pg-0.5μg
    ▶引物
    Oligo dT18
    或随机引物
    或基因特异引物
    0.5μg(100pmol)
    0.2μg(100 pmol)
    15-20 pmol
    ▶RNase-free水 Up to 12.5μL

    2.对富含二级结构的高GC RNA模板,65℃保温5分钟后迅速冰浴2-10分钟。
    3.离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。
    4.按顺序向上述反应液中加入下表各成分,反应终体积为20μL:
    5×RT Buffer 4μL
    RNase Inhibitor 0.5μL(20U)
    dNTP Mix,10mM each 2μL(终浓度1mM)
    耐热型MMLV逆转录酶(H-) 1μL(200U)

     轻柔混匀,短暂离心。
    5.42℃保温60分钟(Oligo dT18或基因特异引物);如果是随机引物则先在25℃保温10分钟,然后再转移至42℃保温60分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板保温温度可以设为55℃。
    6.70℃保温10分钟终止反应后置冰上冷却,得到cDNA。该产物可直接用于PCR扩增或-20℃保存。


    酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达关键词:BTN140388,酿酒酵母NMY51感受态细胞,E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell


    ·自诱导培养基(lac启动子)
    编号:BTN100825
    英文名称:Auto-induction Medium
    规格:200mL
    本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。

    产品特点:
    1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
    2.免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
    3.极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
    4.极大提高外源蛋白的表达量,最高可占细菌总蛋白的45%。
    5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
    6.本产品即开即用,非常方便。
    7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统,如pET系列。
    8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。

    产品组成:
    成分 规格
    成分A 200ml
    成分B 1.25ml
    说明书 1份


    储存条件:常温运输及保存,有效期两年。

    使用方法:

    一、培养基的配制
    1.配制自诱导培养基:将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
     注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
    2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。

    二、培养基的使用
    1.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过夜。
    2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
    3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL,则加入100μl菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
    4.37℃培养过夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
    5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。



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