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957
- 英文名:
E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
干冰运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达
产地:国产|进口
编号:BTN140388
英文名:E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell
品牌:百奥莱博
规格:10×100μL
NMY51感受态细胞是膜系统酵母双杂宿主菌,本产品经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA 。
基因型:MAT a his 3Δ200 trp 1-901 leu 2-3,112 ade 2 LYS2::(lex Aop)4-HIS 3 ura 3::(lex Aop)8-lac Z ade 2::(lex Aop)8-ADE 2 GAL 4
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
想要了解更多关于酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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每支添加于100ml马铃薯葡萄糖琼脂培养基基础中。,用于酵母菌、霉菌的计数"
*甲*(代"酚")绿-甲基橙指示剂 100ml
BL0886 兔抗马IgG免疫血清 0.5ml
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酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达关键词:BTN140388,酿酒酵母NMY51感受态细胞,E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell
·大肠杆菌Rosetta感受态细胞
编号:BTN140379
英文名称:E.coli Rosetta Competent Cell
规格:10*100μl
本产品为采用大肠杆菌Rosetta菌株经特殊工艺处理得到的大肠杆菌化学感受态细胞,具有*霉素抗性,补充大肠杆菌缺乏的6 种稀有密码子(AUA,AGG,AGA,CUA,CCC,GGA)对应的tRNA,提高外源基因,尤其是真核基因在原核系统中的表达水平,经 pUC19质粒检测转化效率高达 109cfu/μg。
基因型:F- omp T hsd SB(rB- mB-)gal dcm pRARE(CamR)
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
·耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)
编号:BTN131210
英文名称:Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-)
规格:10000U
本产品为点突变型M-MLV逆转录酶(RNase H缺失),拥有RNA和DNA聚合酶活性,但由于在RNase H结构域内进行了点突变,该酶缺少RNase H的活性,不会降解第一链CDNA 合成时形成的RNA-DNA 复合物中的RNA,从而可以从长模板中获得高产量的全长cDNA。缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。
产品特点:
1.温度稳定性,点突变产物的热稳定性可防止与二级结构相关的问题,增强了与模板的亲和力。
2.能够在较宽的温度范围内保持活性,在42-45℃之间具有最佳活性,在温度高达55℃时仍有活性。
3.聚合酶活性增强,本产品与其它缺失突变得到的M-MLV 逆转录酶相比,具有更高的cDNA产率。
4.高产量制备全长的第一链cDNA,最长可达13kb。合成时可掺入带有修饰的核苷酸(例如 Cy3-、Cy5-、罗丹明-、*基烯丙基-、荧光素-标记的核苷酸)。
5.广泛的工作范围:提高了逆转录的性能,使得可以在更广泛的酶浓度和底物浓度的条件下工作。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 耐热型MMLV逆转录酶(H-),200U/μL | 50μl |
| 5×RT Buffer | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在无RNase的PCR管中加入如下成分:
| 成分 | 用量 |
| ▶RNA模板 | |
| Total RNA 或poly(A)RNA 或specific RNA |
0.1ng-5μg 10pg-500ng 0.01 pg-0.5μg |
| ▶引物 | |
| Oligo dT18 或随机引物 或基因特异引物 |
0.5μg(100pmol) 0.2μg(100 pmol) 15-20 pmol |
| ▶RNase-free水 | Up to 12.5μL |
2.对富含二级结构的高GC RNA模板,65℃保温5分钟后迅速冰浴2-10分钟。
3.离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。
4.按顺序向上述反应液中加入下表各成分,反应终体积为20μL:
| 5×RT Buffer | 4μL |
| RNase Inhibitor | 0.5μL(20U) |
| dNTP Mix,10mM each | 2μL(终浓度1mM) |
| 耐热型MMLV逆转录酶(H-) | 1μL(200U) |
轻柔混匀,短暂离心。
5.42℃保温60分钟(Oligo dT18或基因特异引物);如果是随机引物则先在25℃保温10分钟,然后再转移至42℃保温60分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板保温温度可以设为55℃。
6.70℃保温10分钟终止反应后置冰上冷却,得到cDNA。该产物可直接用于PCR扩增或-20℃保存。
酿酒酵母NMY51感受态细胞 克隆与表达关键词:BTN140388,酿酒酵母NMY51感受态细胞,E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell
·自诱导培养基(lac启动子)
编号:BTN100825
英文名称:Auto-induction Medium
规格:200mL
本产品是本产品是在pET 专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coli自身对培养基中不同碳源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和生长期后的自动诱发。
产品特点:
1.本产品自动诱导表达,不需要添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。
2.免去了密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选。
3.极大将细菌的生长密度OD600从2左右提高20以上。
4.极大提高外源蛋白的表达量,最高可占细菌总蛋白的45%。
5.与各种细胞培养容器(如培养瓶、培养罐、深孔管、发酵罐等)兼容。
6.本产品即开即用,非常方便。
7.适用于T7 RNA聚合酶基因由lac启动子控制的任何表达系统,如pET系列。
8.不适用于lacZ或lacY突变的宿主菌。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 成分A | 200ml |
| 成分B | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
一、培养基的配制
1.配制自诱导培养基:将1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自诱导培养基。
注意:必须严格无菌操作,否则自诱导培养基非常容易长细菌。
2.贴好标签待用。如果长期时间不用,可以冻存在-20℃。
二、培养基的使用
1.将构建好的质粒转化入细菌,如BL21(DE3),涂于自备的、含有1%葡萄糖的LB培养基中(需要加入适当浓度的抗菌素),37℃培养过夜。
2.挑取单个细菌接种到自备的、含适当浓度抗菌素的液体LB培养基中,37℃培养直到菌液浑浊但不饱和(一般需要6-8小时)。
3.将所得菌液按千分之一的体积比例加入自诱导培养基中(如果自诱导培养基体积是100mL,则加入100μl菌液),同时加入适当的抗菌素。注意:在自诱导培养基中,如果使用卡拉霉素,其终浓度比一般的培养基高,需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧气,因此培养基的体积不能超过三角瓶的五分之一。三角瓶底最好是皱褶式的,这样摇晃中氧气供应更充分。
4.37℃培养过夜,或37℃培养到菌液饱和时降低摇床的温度到所需温度(对温度诱导型启动子)。
5.收集菌液开始蛋白纯化步骤。
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