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E.coli Y187 Rosetta Competent Cell
半年
北京百奥莱博科技有限公司
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百奥莱博专业生产供应北京酿酒酵母Y187感受态细胞厂家,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京酿酒酵母Y187感受态细胞厂家
编号:BTN140389
规格:10×100μL
英文名:E.coli Y187 Rosetta Competent Cell
品牌:百奥莱博
产地:北京
Y187菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母单杂,双杂实验用菌株,MATα型,可直接转化质粒或与MATa型酵母菌株(Y2HGold,AH109等)通过mating 操作进行筛库试验。Transformation marker 为: trp1,leu2,报告基因为:lacZ,MEL1。Y187-GAL4 酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:PGBKT7和PGADT7。质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N 端1~ 174 位*基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒PGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C 端768~881 位*基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4 系统原理:一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域:位于N 端1~174 位*基酸区段的DNA 结合域(DNA-BD)和位于C端768~881 位*基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD 单独存在不能激活转录,但当二者接近时,则呈现完整的GAL4活性,使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下,BD 不与AD结合,将要检测的蛋白质分别与BD和AD 融合,形成 bait 融合蛋白(bait -BD)和prey融合蛋白(prey-AD),如果 bait和prey发生相互作用,就会促使 BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。Y187 有两个报告基因:lacZ,MEL1,分别由两种不同的启动子(G1,M1)启动,这两种启动子只有GAL4 识别的17bp 核心区相同,其余部分均不同,大大降低了酵母双杂假阳性发生的概率。
Y187感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,本产品经特殊工艺制作而成,经PGADT7质粒检测转化效率为104 cfu/μg DNA。
菌株基因型:MATα,ura3-52,his3-200,ade 2-101,trp 1-901,leu 2-3,112,gal4Δ,met–,gal80Δ,URA3: :GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ,MEL1
产品组成:
成分 | 规格 |
Y187感受态细胞 | 0.1ml×10支 |
PGADT7(control vector),10 ng/μL | 10μl |
Carrier DNA,5μg/μL | 100μl |
PEG/LiAc | 5ml |
说明书 | 1份 |
北京百莱博科技有限公司专业生产克隆与表达产品,欢迎来电咨询选购北京酿酒酵母Y187感受态细胞厂家。
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