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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
272
- 英文名:
E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
10×100μL
特别提示:包括酿酒酵母NMY51感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:酿酒酵母NMY51感受态细胞
英文名称:E.coli NMY51 Rosetta Competent Cell
产品货号:BTN140388
产品规格:10×100μL
NMY51感受态细胞是膜系统酵母双杂宿主菌,本产品经PGADT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA 。
基因型:MAT a his 3Δ200 trp 1-901 leu 2-3,112 ade 2 LYS2::(lex Aop)4-HIS 3 ura 3::(lex Aop)8-lac Z ade 2::(lex Aop)8-ADE 2 GAL 4
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
除了酿酒酵母NMY51感受态细胞,,我公司还供应以下相关产品:
名称:酿酒酵母EGY48化学感受态细胞
货号:BTN140387
规格:10×100μL
EGY48感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株,MATα型,可转化质粒或mating 操作。Transformation marker为his3,trp1,ura3 ,报告基因为LEU2 。本产品经PGBKT7质粒检测转化效率为104cfu/μg DNA。
基因型:MAT α,ura3,his3,trp1,Lex Aop(x6)-LEU2
储存条件:干冰运输,-80℃保存,有效期6个月。
名称:pUCm-T载体
货号:YT441
规格:20次
UCm-T载体是用于克隆含有A末端PCR产物的理想载体。可以通过蓝白斑筛选有插入片段的重组克隆。很多DNA聚合酶在进行PCR扩增时会在PCR产物双链DNA每条链的3’端加上一个突出的碱基A。pUCm-T载体是一种已经线性化的载体,载体每条链的3’端带有一个突出的T。这样,pUCm-T载体的两端就可以和PCR产物的两端进行正确的AT配对,在连接酶的催化下,就可以把PCR产物连接到pUCm-T载体中,形成含有目的片段的重组载体。
pUCm-T载体的主要信息如下
| Base pairs | 2773 |
| Lac Z promoter | 142-171 |
| M13/pUC Sequencing Primer | 204-221 |
| Lac Z | 222-534 |
| Multiple cloning region | 233-376 |
| M13/pUC Reverse Primer | 378-395 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 972-1832 |
| ColE1 origin of replication(rep) | 1987-2606 |
pUCm-T载体的图谱如图1:
储存条件:-20℃。
名称:BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞
货号:MQ0038
规格:10×100μl/50×100μl
BL21(DE3)pLysS感受态细胞携带pLysS质粒,具有氯霉素抗性。
pLysS含有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达,适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),BL21(DE3)pLysS感受态细胞由特殊工艺制作经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:
F-ompT hsdS(rB-mB-)gal dcm(DE3)pLysS Camr
操作说明:
1.取100μl冰上融化的L21(DE3)pLysS感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含34 µg/ml氯霉素及所选质粒筛选抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5.为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
6.BL21(DE3)pLysS菌株携带pLysS质粒,除复苏培养基为无抗生素外,其余所用培养基、培养液均应含有34 µg/ml氯霉素,以防质粒丢失。
名称:Lipofect脂质体转染试剂
货号:GL2118
规格:0.5ml|1ml|5×1ml
用途:
适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞。
注意事项:
无菌溶液,是一种新型的阳离子脂质体转染试剂,具有低细胞毒性;对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率。
储存条件:4℃,12个月
名称:植物电穿孔缓冲液
货号:GL1190
规格:100ml
用途:
植物电穿孔
注意事项:
主要由PBS、甘露糖醇、氯化钙组成。
储存条件:4℃,6个月
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文献和实验酿酒酵母感受态细胞的制备 (1)从YPD平板上挑取一个新鲜的酿酒酵母EBY100单克隆至10 ml YPD液体培养基,30℃,250 rpm 培养过夜。 (2)测定过夜培养物的OD600值为3.0~5.0之间。 (3)将10 ml YPD过夜培养物稀释至OD600值为0.2~0.4。 (4)在28~30℃摇床中继续培养3~6 hr,使其OD600值达到0.6~1.0。 (5)于室温1500 g 离心5 min 收集酵母细胞,弃上清。 (6)用10 ml 洗液洗酵母
0:00 利用酿酒酵母定量蛋白质组学鉴定蛋白质复合物0 0:45 内容简介45 1:17 准备诱饵以及SILAC对照菌种77 2:44 研磨细胞164 4:05 预清除细胞裂解物245 5:51 利用TEV蛋白酶切割作用从IgG 包被珠上洗脱下蛋白质351 6:45 三氯乙酸沉淀405 8:11 乙醇/醋酸盐沉淀491 9:00 蛋白质印迹法和/或银染法分析样品540 9:30 代表性成果/结果570 10:15 结论615 利用酿酒酵母定量
杆菌菌株 酵母DNA提取 酵母的基因组怎么抽提? 请教如何从酿酒酵母抽提质粒 有谁做过酵母DNA的提取,请帮一下忙! 紧急求助:来看看我的假丝酵母总DNA电泳图,是不是降解了。 请教提取酵母基因组 请问蜗牛酶的用法 從酵母、蒼蠅到人(霍華休斯醫學研究中心, HHMI) 我提取酵母总DNA的快速、低成本方法。与大家分享! 怎样酵母破碎提质粒? 质粒酵母转化问题 为什么质粒酵母电转化不进去?? 酵母真核表达的感受态细胞的制备及电击转化的参数
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