PCR专用LIC克隆套装北京价格

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百奥莱博专业生产供应PCR专用LIC克隆套装北京价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：PCR专用LIC克隆套装北京价格
英文名：LIC Cloning Kit for PCR
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN120402
规格：1μg
本产品就是基于LIC原理开发的即用型载体。LIC就是不依赖于连接的克隆技术(Ligation-Independent Cloning),它是继限制性内切酶切/连接酶克隆方法后出现的第二代DNA克隆技术，它效率高,尤其适用于大规模分子克隆，其原理如下：


产品特点：
1. 操作简单,一管式一步反应,只需加入插入片段即可,客户不需要购买任何额外的酶。
2.时间短,整个过程只要15分钟。
3.高效,比常用的AT克隆效率更高,阳性率接近于100%。
4. 克隆方向和位置精准和可控,适合表达型克隆工作。
5. 便于自动化,适合高通量克隆。
6.适用于长片段克隆。

产品组成：

 

成分	规格
LIC载体(50μg/μL)	1μg
溶液A	10μl
溶液B	150μl
阳性对照插入片段	8μl
说明书	1份

储存条件：-20℃运输及保存，有效期一年。

一. PCR引物设计,合成和PCR反应
1. 按常规方法设计PCR引物,只是必须在一条引物5´端再加上GGCGGCCGCGGTAC序列,在另一条引物5´端加上GGCGCCGGCGGTAC序列。此序列决定克隆的方向,如果不在乎方向,可以随机组合。
2. 所用引物最好为HPLC纯化获得。注意：如果购买本公司产品,免费合成LIC引物一对。
3. 按常规的方法进行PCR,最好使用高保真DNA聚合酶。
4. 按常规的胶回收的方法回收PCR片段。注意：必须去除残余的dNTP和PCR引物,否则会极大降低LIC效率。
5. 对PCR片段电泳定量,即电泳后通过肉眼比较PCR片段和DNA Marker的相对强度,通过DNA Marker条带的浓度(一般商品化的DNA Marker每条带的浓度都是已知的)推测出PCR片段的浓度。
二. PCR片段与载体退火
1.在纯化的2μL PCR产物中加入0.4μL溶液A、2μL载体(100ng)以及5μL溶液B,混合。
 注意：PCR产物跟载体的摩尔数比例最好是1：1。
2.室温放置5分钟。注意：保温时间长短很关键,不要轻易延长或缩短。
3.在PCR仪器上按75℃ 10分钟,然后放冰上或-20℃待用。
三.转化
1. 按常规方法进行转化。
2. 按菌落PCR方法筛选,可选用我公司的菌落PCR试剂盒(BTN50901)。进行快速筛选,需要T7和SP6 RNA聚合酶启动子引物。

我公司的PCR专用LIC克隆套装北京价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
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高效核酸转染试剂 
ARB12235 大鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)酶标法分析 Rat serum amyloid a,saa ELISA KIT
BTN130423 Q交换介质 Q Medium
DN3601 尿液基因组DNA快速提取试剂盒
0.5%焦油紫染色液   50ml
安替比林 Lithium metaborate octahydrate 60-80-0
9041-36-5 葡聚糖凝胶G-200 Sephadex G-200 medium
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Warthin-Starry银染色液   2×50ml
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2′-脱氧腺苷-5′-三磷酸二*盐 Penicillin&Streptomycin&Neomycin solution,γ-Irradiated 74299-50-6
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F030204 HRP标记小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG*HRP
真菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法)   50T|100 T
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·LB培养基
编号：BTN100602
英文名称：Lysogeny Broth Medium，Powder
规格：250g
LB培养基是由美国科学家Giuseppe Bertani在1951年独立开发。但现在常用的LB配方是由Miller修改而成，主要是去掉Glucose并把NaCl浓度从0.5 g/L增加到10 g/L。本产品就是根据Miller配方制备的干粉型培养基。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

使用方法：称取本产品25.0 g于1 L蒸馏水或去离子水中，加热溶解，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。

·Maximov固定液
编号：BTN131288
英文名称：Maximov Fixative Solution
规格：250mL
本固定液主要成分为*化汞、重铬酸*、甲醛。与Zenker固定液相比，本产品不含铬酸，所以重铬酸*未被酸化，因此，对细胞浆固定较好。甲醛有促染胞浆的作用，增加对酸性染料的亲和力。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·粪便DNA提取试剂盒
编号：BTN70601
英文名称：Stool DNA extraction kit
规格：100次
本试剂盒是专门用于从各种动物粪便中提取高质量的DNA的试剂。动物粪便中夹杂着许多脱落的肠道上皮细胞和肠道病原菌，因此通过PCR 对粪便DNA进行分析是诊断肠道遗传病(如大肠癌等)和传染病的重要材料，具有比常规的结肠镜检测和大便隐血实验更高的特异性和灵敏度。通过PCR 对粪便DNA进行分析还可以对濒危物种进行遗传分析。但粪便中成分复杂多变，常含有对PCR等后续反应有极大的抑制作用的不明成分，所以从粪便中提取高纯度的DNA十分棘手。

产品特点：
1. DNA 纯净，OD260/280一般都在1.8以上，得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR等后续反应。
2. 每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品，能得到5μg左右DNA，片段长度在30Kb左右。
3.可以同时提取到肠道上皮细胞和肠道病原菌的DNA。
4. 操作过程简单快速，只需要30分钟。
5.扩容性好，既可以在1.5mL离心管中微量提取，也可以在50mL离心管中进行大规模制备。
6. 试剂无毒无害，环保。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
说明书	1份

注：溶液A和溶液B均为无色液体，溶液A 4℃保存时会产生沉淀，用前需要65℃溶化并混匀。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
下面的操作步骤为1.5mL塑料离心管中进行的微量提取。如果样品用量增加，需要使用大的离心管，各提取试剂的用量也需要按比例增加。

1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，然后取0.5mL 加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。最好使用螺旋盖离心管。
2. 取0.1-0.3 g的新鲜或冷冻的动物粪便，加入到含预热溶液A的离心管中，震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意:一定要让管底的样品充分震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 13000-15000g室温离心3分钟，将上清转移到一新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒使之充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 13000-15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 13000-15000g室温离心3分钟，小心转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
10. 重复第8 步和第9 步一次。
11. 将上清转移到新的1.5mL离心管时，不要超过0.5mL，否则没有空间加两倍体积的乙醇。如果有多余的可以弃之不用。
12. 加入2倍体积的乙醇(自备)，上下颠倒30秒混匀，15000g离心5-10分钟，弃上清，管底将有微小DNA沉淀。注意：最好不要用异丙醇代替乙醇，否则不容易去除带色素的杂质。
13. 加入1mL 75%乙醇(自备)，震荡数秒，13000-15000g室温离心3分钟，弃上清。
14. 重复上步清洗一次。注意：75%乙醇洗两次有助于去除PCR 抑制物。
15. 短暂离心，吸弃残留的75%乙醇(约50μL)，室温晾干。注意：一定要去除残留的75%乙醇，否则会影响后续反应和电泳上样(样品会飘走)。
16. 加入30μl TE缓冲液溶解沉淀。注意：不知道样品DNA产率前最好不要加过多TE。如果DNA浓度高，可以再加TE 稀释。如果DNA 有颜色,可以使用柱式腐殖酸清除剂(BTN60801)纯化一次。
17. DNA 即可用于电泳、酶切和PCR等反应。最好用原液和稀释液对照做PCR，最好按PCR 终体积的1/10 加入随赠的PCR 抑制物清除剂(BTN60804)。


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