细胞周期（流式法）

细胞周期（流式）
一、技术简介
    细胞周期（cell cycle）是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期两个阶段。间期分为三期，即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期）。细胞的有丝分裂（mitosis）需经前、中、后、末期。G0期是脱离细胞周期暂时停止分裂的一个阶段。但在一定适宜刺激下，又可进入周期。G0期细胞处于阻留的状态，细胞通过M期一分为二，有的可继续分裂进行周期循环，有的转入G0期。细胞周期内有两个阶段最为重要：G1到S和G2到M；这两个阶段正处在复杂活跃的分子水平变化的时期，容易受环境条件的影响，如果能够人为的进行调控，将对深入了解生物的生长发育和控制肿瘤生长等有重要意义。
    流式细胞仪(flow cytometry或flow cytomyter，FCM)又称荧光活化细胞分拣器(fluorescence activated cell sorter，FACS)，是20世纪60年代后期利用激光器和层流流动室而建立的一种用于测定放射性染色体的新技术。用FCM进行细胞周期分析是通过测定细胞中DNA量而完成的。测定DNA含量后，可用FCM配备的细胞周期分析软件对其进行自动分析。测定的细胞周期按照DNA的量分可为G0/G1期、S期及G2/M期。
二、实验流程
1. 待测样本制成单细胞悬液，然后200 g离心5分钟，弃上清。
2. 用4^oC预冷的70%冷乙醇固定，4^oC保存，至少固定12小时。
3. 调整细胞浓度为10⁶/mL，取1 mL细胞悬液，用PBS洗三次，细胞重悬于1 mL PI染液中，37^oC孵育30分钟即可进行流式分析。
三、服务说明及结果
1. 客户提供：培养好的细胞以及所需药品。
2. 公司提供：原始数据及分析结果、完整的实验报告。
3. 实验周期：10个工作日，具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。