LBA4404农杆菌电转感受态细胞

特别提示：包括LBA4404农杆菌电转感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：LBA4404农杆菌电转感受态细胞
英文名称：LBA4404 Electroporation-Competent Cell
产品货号：MQ0061
产品规格：10×50μl/50×50μl

LBA4404菌株为Ach5型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型Ti质粒pAL4404，此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件，pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。
pAL4404型Ti质粒含有筛选标签：strep，赋予LBA4404菌株链霉素抗性，适用于菸草、番茄、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率可达104cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
Ach5(rifR)Ti pAL4404(strepR)Octopine
操作说明：
1.取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100μl感受态加1μg(体积不大于10μl)质粒DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。
3.加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。
4.6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天(当平板只含有50μg/ml kan时，28℃培养48h即可；平板中同时加入50μg/ml kan，20μg/ml rif时，需28℃培养60h；如果使用的平板含有50μg/ml rif则需要28℃培养72-90h)。
注意事项：
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
注意事项：
1.加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2.混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
4.利福平浓度不应高于25μg/μl，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有50μg/ml kan，若所用平板含有20μg/ml rif则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。

除了LBA4404农杆菌电转感受态细胞,，我公司还供应以下相关产品：


BTN130828 DNA去磷酸化试剂盒 20次
BTN160101 pUCm-T载体 1μg
BTN60603 即用型蓝白T载体A型(T7-SP6，有MCS) 20次
BTN120515 即用型蓝白T载体E型(无RNA启动子，无MCS) 20次
BTN140576 大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞 0.1mL*10
BTN130564 大肠杆菌Tuner(DE)plysS感受态细胞 0.1mL*10
BTN120690 红霉素溶液 10mL
BTN60208 硫酸卡那霉素溶液 10mL
BTN60209 盐酸四环素溶液 10mL
YT444 GL6-miR报告基因质粒 1μg
YT454 Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒) 1μg
ALH352 DNA加A尾试剂盒  50次
RFT113 JM109化学感受态细胞 20×100μl
SY0018 XL10-Gold化学感受态细胞 100μl×10管
SY0284 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒(不含MCS多克隆酶切位点) 20T
JN0001 一步定向无缝克隆试剂盒 20次|100次
JN0125 BL21(DE3)感受态细胞(pG-KJE8分子伴侣) 100μl×10
QN1046 pUC19载体 20ug
QN1057 20×SSC缓冲液，pH5.3 100mL|500mL
MQ0006 JM109化学感受态细胞 20×100μl/100×100μl
MQ0019 BJ5183化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
MQ0020 BJ5183-AD-1化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
MQ0037 BL21(DE3)化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
MQ0045 Rosetta-gami B(DE3)化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
MQ0053 GV3101农杆菌感受态细胞 10×100μl/50×100μl
BTN81109 酵母化学感受态细胞制备试剂盒 20次
GL2118 Lipofect脂质体转染试剂 0.5ml|1ml|5×1ml
GL2121 PolyLea非脂质体转染试剂 0.5ml|1ml|5×1ml
GL1187 氯化钙细菌感受态制备液 100ml