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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
225
- 英文名:
JM110 Competent cell
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括JM110化学感受态细胞特价促销在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:JM110化学感受态细胞特价促销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:RFT114
本公司生产的JM1110感受态细胞采用经特殊工艺处理得到,可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测,转化效率可达108cfu/μg,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。
基因型:rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIq lacZΔM15]
产品特点:
1、JM 110 是一种甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株,使DNA 不被甲基化,使用其转化所得到的质粒DNA,可被对dam、dcm 甲基化敏感的限制酶切割。
2、只适用于转化质粒DNA。
3、细胞具有硫*(代"酸")链霉素(Strr) 抗性。
操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(50μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3分钟,该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀,吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收,倒置平板,37℃培养12—16小时。
注意:涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200—300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少,可通过离心(4000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)
注意事项:
1. 感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免感受态细胞的转化效率。
2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3. 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。
储存条件:-70℃,有效期6个月。
关于JM110化学感受态细胞特价促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·GelHong红色核酸凝胶染料
编号:RFT153
英文名称:GelHong Red nucleic acid gel dye
规格:500μl
本品是一种可以替代*化乙锭(EB)的红色荧光核酸染色剂。与SYBR或EB相比,本红色核酸染料最显著的特性是其在多种条件下的高灵敏性和稳定性。另外相对EB或SYBR,GelHong诱导突变的能力极低。
使用方法:
注意:染料使用前应在室温下彻底融化混匀后使用。
1、GelHong预染方法
1.1、将GelHong试剂按1:10000溶于琼脂糖凝胶溶液中,充分混匀。(例如:将5μl GelHong 试剂加入到50ml 凝胶溶液中)。注:由于GelHong 具有出色的热稳定性,可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中,而不用等凝胶溶液冷却后再加入。
1.2、浇制凝胶并使其凝固后上样电泳。
注意:使用这种预先加入染色剂的琼脂糖凝胶,每次不易加入太多的 DNA 样品,否则容易造成饱和现象,可以做多个不同浓度的 DNA Marker,以确定最佳 DNA 上样量。
1.3、紫外下观察结果。
注:如果始终出现拖尾或是条带无法分离的现象,您可以使用后染法对DNA染色,以确认问题是否与染色剂有关。如果使用后染法问题依旧存在,则说明问题与染色剂无关,请尝试减少核酸的上样量后进行电泳。
2、GelHong后染方法
2.1、用H2O将GelHong稀释约3,300倍到0.1M Nacl中,制成3X染色溶液。(例如:将15μl GelHong和5ml的1M NaCl加入到45ml H2O中)。注:GelHong 1X染色溶液同样可用于后染,但其灵敏度要低于3X染色溶液。
2.2、将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙*(代"烯")容器中。缓慢加入足量的3X染色溶液浸没凝胶。
2.3、在室温下轻轻地摇动凝胶板,最佳的染胶时间为30 分钟,这取决于凝胶板的厚度、琼脂糖或聚丙*(代"烯")酰胺的浓度和 DNA 的长短。凝胶越厚或琼脂糖的浓度越高,染色所需要的时间就越长。注:染色溶液至少可重复使用2-3次。如果不是立即再用的话,建议将用过的染色溶液冷藏保存。
2.4、紫外下观察结果。
储存条件:4℃避光,有效期3年。
JM110化学感受态细胞特价促销关键词:RFT114,JM110化学感受态细胞,JM110 Competent cell
·66KD蛋白Marker
编号:RFT041
规格:50mg
本产品包含一种已知分子量的标准蛋白质,分子量大小为66kD,可以用来判断SDS-PAGE未知蛋白的分子量。本品以干粉状态提供。
使用方法:
1、配制10mg/ml 66kD蛋白Marker母液:取10mg 粉末溶于1ml超纯水中。此溶液-20℃贮存。
2、按照下表配制Marker溶液
| 配制量 | 浓度 | 66KD母液(10mg/ml) | 超纯水 | 5×DualColor蛋白上样缓冲液 |
| 10μl | 0.2 μg/μl | 0.2μl | 7.8μl | 2μl |
| 50μl | 0.2 μg/μl | 1μl | 39μl | 10μl |
| 100μl | 0.2 μg/μl | 2μl | 78μl | 20μl |
3、取配制好的溶液彻底混匀后,95℃处理5分钟立即上样电泳,每次上样10μl。
4、电泳结束后,染色,观察结果。
储存条件:-20℃。
JM110化学感受态细胞特价促销关键词:RFT114,JM110化学感受态细胞,JM110 Competent cell
5-*-4*-3-吲哚-β-D-半乳糖苷 PAAS 7240-90-6
F030637 FITC标记山羊抗人IgG FC抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*FITC
ARB11295 人钩端螺旋体(LeptospIrA)ELISA检测服务
ARB10157 人Salusin-α elisa检测操作说明书 Human Salusin α ELISA KIT
ARB12395 大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)Elisa定量检测 Rat monocyte chemotactic protein 4,mcp-4 ELISA KIT
脱*乙酸 Glycine tert butyl ester hydrochloride 520-45-6
11028-71-0 ConA Type A Ⅳ 刀豆蛋白A Ⅳ
CYB168002 特级新生牛血清 100ml/瓶
ARB14145 大鼠β淀粉样蛋白(Aβ)含量分析
改良型Krebs-Henseleit粉剂(无碳酸**) 1L
ARB13093 小鼠细胞周期素D3(CyclIn-D3)定量分析 Mouse cyclin-d3 ELISA KIT
ARB10381 人本周蛋白(BJP)ELISA代测服务 Human bence-jones protein,bjp ELISA KIT
E0618 抗凝裂解绵羊血
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