DAPI双链DNA染料供应

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")DAPI双链DNA染料供应，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：DAPI双链DNA染料供应
编号：SY0495
英文名：DAPI dihydrochloride
规格：10mg
DAPI，也称DAPI dihydrochloride，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。因为DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，microplasm DNA以及染色体DNA。DAPI-DNA复合物的激发和发射波长分别为360nm和460nm。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。

CAS：28718-90-3
分子式：C16H17Cl2N5
分子量：350.25
纯度：>90% (from N)

注意事项
1)DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2)荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

欲咨询购买DAPI双链DNA染料供应，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·小鼠抗Myc-tag单克隆抗体
编号：SY0650
英文名称：Myc-tag, Mouse mAb
规格：20μl(＞50次)
本品为小鼠抗Myc-tag单克隆抗体，小鼠抗Myc标签单克隆抗体。推荐稀释比例：WB（1:5000），IF（1:2000），IP（1:200），ELISA（1:2000）。

本抗体可用于检测带Myc标签的融合蛋白及天然c-Myc蛋白。

c-Myc蛋白是一种位于细胞核内的转录因子，参与细胞增殖、分化和凋亡等生理过程。研究表明，在胃癌、乳腺癌、结肠癌和宫颈癌等许多肿瘤组织或细胞中，c-Myc蛋白的表达量要明显高于正常组织和细胞中的表达量。

Myc标签（EQKLISEEDL）是来自c-Myc蛋白的一段多肽，由于分子量很小，不会影响融合蛋白的生物特性，广泛用于检测细菌、酵母菌、昆虫和哺乳动物细胞等系统中融合蛋白的表达。Myc标签可以放在C端或N端，Myc融合蛋白可通过偶联Myc标签抗体到二乙*(代"烯")砜活化的琼脂糖上而进行亲和纯化，但c-Myc融合蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力，因此c-Myc标签系统多应用于检测但很少用于纯化。

反应性：All
应用：ELISA, IF, IP, WB
免疫原：偶联KLH的人c-Myc 合成多肽（410-419*基酸残基）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。


DAPI双链DNA染料供应关键词：DAPI dihydrochloride,28718-90-3,DAPI双链DNA染料


·细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒
编号：SY0327
英文名称：Membrane and Cytosol Protein Extraction Kit
规格：50T
细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒用于快速便捷分离细胞/组织细胞膜和细胞浆蛋白，抽提的膜蛋白不仅包括质膜上的蛋白，也包括线粒体膜、内质网膜以及高尔基体膜等上的膜蛋白。主要工作原理：通过匀浆适度破碎细胞，经低速离心去除细胞核和少数未破碎的细胞产生的沉淀，随后取上清高速离心获得细胞膜沉淀和含有细胞浆蛋白的上清，然后通过优化的膜蛋白抽提试剂从沉淀中抽提获取膜蛋白。整个过程仅需约90min即可完成，抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE，Western、酶活性测定等后续实验。

膜蛋白抽提试剂中含有蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和EDTA等，后续不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影响的酶的活性测定，但抽提获得的膜蛋白或细胞浆蛋白适合用于检测蛋白的磷酸化水平。

按照说明书步骤的用量（细胞2-5×107个；组织约100mg），SY0327可分别进行50个样品的抽提，具体用量可根据不同的样品体积进行调整。

试剂盒组份：
试剂A：50ml
试剂B：15ml

储存条件：-20℃，有效期一年。

注意事项
1）客户需自备PMSF，PMSF需现配现用，建议在抽提试剂加入到样品前2-3min加入，以防失效。
2）利用本试剂盒抽提到的细胞膜/细胞浆蛋白可直接用BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)（Yeasen Cat#20201）测定其浓度，但不适合用Bradford法测定。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
室温融解并混匀试剂A和B，融解后立即置于冰上。取适量的试剂A和B备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使其最终浓度为1mM。

1 样品准备
1）细胞样品
① 细胞收集
贴壁细胞：培养细胞约2-5×107个，PBS清洗一遍，用细胞刮子刮下细胞或用含有EDTA但不含胰酶的细胞消化液处理细胞，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。
【注】：尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的膜蛋白。
悬浮细胞：培养细胞约2-5×107个，离心收集细胞，吸除上清，留下细胞沉淀备用。
② 细胞清洗
用适量冰浴预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀，取少量细胞用于计数，剩余细胞4℃，600g离心5min沉淀细胞。弃上清，随后4℃，600g离心1min，以沉淀离心管管壁上的残留液体并进一步沉淀细胞，尽最大努力吸尽残留液体。
③ 细胞预处理：把1ml试剂A(含PMSF)加入至上述细胞中，轻轻并充分悬浮细胞，冰浴放置10-15min。
2）组织样品
取约100mg组织，用剪刀尽量小心剪切成细小的组织碎片。加入1ml试剂A(含PMSF)，轻轻悬浮组织碎片，冰浴放置10-15min。【注】：如果组织样品比较少，也可以使用更少的组织量，例如30-50mg，后续试剂的用量及操作步骤不变；组织用量较少时，最后获得的膜蛋白也较少。

2 样品的破碎及破碎效果的鉴定
① 样品匀浆：把细胞悬液或组织样品转移到一适当大小的冰浴预冷玻璃匀浆器中，匀浆约30-50下。【匀浆效果与细胞类型和组织类型相关，不同细胞或组织所需的匀浆次数有所不同，需自行优化。】
② 通常在匀浆30次后取约2-3µl匀浆液滴在盖玻片上并在显微镜下观察，如见细胞核周晕环(A shiny ring around the nuclei)或完整的细胞形态，说明细胞仍完整。如果有70-80%的细胞均无核周晕环和完整细胞形态，说明细胞已经充分破碎，则进行下一步实验。否则，重新匀浆10-30次直到细胞至少70%已经破碎。同时记录对于该细胞的匀浆次数，通常在后续实验时不必再摸索匀浆次数。另外需注意特定的匀浆次数和匀浆器也有关，需同时注意记录使用的是哪一个匀浆器。
【注】：如果没有适当的玻璃匀浆器，对于培养的细胞也可以采用反复冻融法来破碎细胞。把样品在液氮和室温依次反复冻融两次，然后取少量样品在显微镜下检测细胞破碎的程度。如果细胞破碎的程度不足70%，可增加冻融次数，直到细胞破碎的程度大于70%。

3 去除细胞核和未破碎的细胞
在4℃，700g离心10min，小心收集上清液至一新的离心管中。【注】：吸取上清时切勿接触沉淀！可以有约30-50µl上清液残留不予吸取，以保证吸取的上清液有较高的纯度。

4 沉淀细胞膜碎片
在4℃，14000g离心30min，以沉淀细胞膜碎片。

5 收集细胞浆蛋白
吸取上清至1新的离心管中，即为细胞浆蛋白，可-70℃保存备用。吸取上清时可以有30-50µl上清残留，以避免接触沉淀导致上清样品被污染。

6 抽提膜蛋白

4℃，14000g离心10sec，尽最大努力吸尽上清。可以轻轻触碰到沉淀，甚至吸走很少量的沉淀。加入试剂B 200µl(如有必要，也可加大到300µl)，最高速剧烈Vortex 5sec重悬沉淀，冰浴5-10min。重复前述步骤的vortex和冰浴孵育1-2次，以充分抽提膜蛋白。随后，4℃，14000g离心5min，收集上清即为细胞膜蛋白溶液。可-70℃保存备用。对于一些有特殊用途的膜蛋白，可自行配制适当的膜蛋白抽提试剂进行膜蛋白抽提。


DAPI双链DNA染料供应关键词：DAPI dihydrochloride,28718-90-3,DAPI双链DNA染料

CYB168005 山羊血清 500ml/瓶
但马胶 Saponin 9000-16-2
ARB10888 人抗流行性腮腺炎病毒(EP-Ab)elisa测定使用说明书 Human anti-epidemic parotitis antibody,ep-ab ELISA KIT
F020235 兔抗人γ链抗体 Rabbit Anti-Human IgG (γ chain)
BTN100409 6 nt随机引物 Hexamer
ARB10822 人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)ELISA代测服务 Human anti-gliadin antibody,aga ELISA KIT
血管紧张素转换酶 Sodium succinate dibasic 9015-82-1
ARB10290 人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)含量测试 Human alpha-fetoprotein lens culinaris agglutⅡn 3,afp-l3 ELISA KIT
F050303 人IgM抗体 Human IgM
ARB11771 人腺病毒抗原(ADV-Ag)含量检测 Human adenovirus antigen,adv-ag ELISA KIT
HC0118 透析袋夹子
PY01-013-1  酵母浸粉  1公斤  
525-79-1 Kinetin   激动素
F030626 FITC标记兔抗大鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Rat IgG*FITC
ARB13196 小鼠脂氧素(LXA4)含量分析 
F040108 鸡卵清蛋白偶联莱克多巴胺 OVA-RAC

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