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文献和实验HEPES: 1M = 238.3g/litre, therefore 10mM = 0.59g/250ml MgCl2 : 1M = 203.3g/litre, therefore 1.5mM = 0.076g/250ml KCl: 1M = 74.5g/litre, therefore 10mM = 0.187g/250ml DTT: 1M = 154.2g/litre, therefore 0.5mM = 0.019g/250ml
做了两个月的时间的 western blotting 终于出了比较好的结果。 老板让整理出protocol 这是写的PROTOCOL 大概会有很多错误请大家指正！谢谢先 WESTERN PROTOCOL A. Preparation of Samples 1. Get the heads of the fly 2. Stir them in the lysis buffer(4heads/10ul) 3. Add 2XSDS-gel-loading buffer
Steady State ATPase Assays Coupled Enzyme System
. 5. Make Tris-MgCl2 -DTT mix for all assays. Tris-MgCl2 -DTT mix = (n = # of assays + 1) n x 20 µL 0.5 M Tris-OAc, pH 7.5 20 µL 10 mM MgCl2 20 µL 10 mM DTT 70 µL DDW
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