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- 2025年12月10日
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30% 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺溶液
Bio-Rad 提供用于管式凝胶IEF 2-D 电泳系统的多种丙烯酰胺选择。
聚丙烯酰胺是一种常用的电泳基质，由丙烯酰胺与共单体交联剂（如甲叉双丙烯酰胺，bis）的自由基聚合而 成。可靠的电泳结果取决于这一反应的可重复性，高纯度的起始试剂是影响凝胶质量的一个重要因素。Bio-Rad 99.9% 超纯丙烯酰胺经过严格的纯化和测试，具有均衡聚合所需的一切品质。丙烯酰胺有3 种形式，可满足每个 实验室的需要：
- 丙烯酰胺粉剂― 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺粉剂，浓度和丙烯酰胺/ bis 比率可调
- 预混合丙烯酰胺/ 甲叉双丙烯酰胺粉剂― 含量固定的Bio-Rad 99.9% 超纯丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺。直接加入 一定量的超纯水即可配制成30-50% 的储存液。
- 丙烯酰胺溶液― 可直接使用，有2 种浓度（30% 和40%），3 种丙烯酰胺/ bis 比（19 :1，29 :1 和37.5 :1）
| 比率 | %C | 常规应用 |
| 19:1 | 5 | DNA 测序 |
| 29:1 | 3.3 | 蛋白分离 |
| 37.5:1 | 2.6 | 蛋白分离 |
确定孔径:%T and %C
丙烯酰胺凝胶孔径大小由2个参数决定。总的单体浓度（%T）定义为：
通过调节这两个参数，可优化孔径大小以获得目标分子最佳分离效果和分辨率。如果你在确定最佳的%T 和%C 方 面需要帮助，请与Bio-Rad 技术支持联系。
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文献和实验化物酶同工酶的红褐色酶谱。该酶活性染色过程如下：过氧化物酶分解H2O2 产生氧基，后者使联大茴香胺发生反应生成褐色化合物。所以用染色液浸泡凝胶时，有过氧化物酶同工酶蛋白质条带的部位便出现褐色的谱带。倒掉染色液，重新加入7%的乙酸溶液，于日光灯下观察记录酶谱，绘图或照相。 五、附注 1．如果室温较高，可适当减少电流，延长电泳时间，或采取降温措施，以免温度过高造成酶活损失。 2．工业纯丙烯酰胺（Acr）和甲叉双丙烯酰胺（Bis）的纯化方法 （1）Acr的纯化 称取70g的Acr，于50℃溶于
一、目的要求1.学习电泳原理和技术。2.学习和掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术。二、原理聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂N，N-甲叉双丙烯酰胺（N，N-methylene-bisacylamide，简称Bis）在加速剂N，N，N，N-四甲基乙二胺（N，N，N，N-tetramethyl ethylenedia mine，简称TEMED）和催化剂过硫酸铵[ammonium persulfate（NH4）2S2O8，简称AP）或核黄
6.8），5ml 50%甘油，2ml 10%的SDS，0.5ml巯基乙醇，1ml 1%溴酚蓝，0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周，或在-20℃保存数月。2. 凝胶贮液：在通风橱中，称取丙烯酰胺30g，甲叉双丙烯酰胺0.8g，加重蒸水溶解后，定容到100ml。过滤后置棕色瓶中，4℃保存，一般可放置1个月。3. pH8.9分离胶缓冲液： Tris 36.3g ，加1mol/L HCl 48ml，加重蒸水80ml使其溶解，调pH8.9，定容至100ml， 4℃保存。4. pH6.7浓缩胶缓冲液： Tris 5.98
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