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1000
1年
兰博利德
4度保存
~125块胶
货号:P0105
存储条件:APS,-30~-15℃保存,≤0℃运输,可在2~8℃保存至少3个月;其他组分,2~8℃保存。
产品简介:
10% AB液蛋白快速制胶试剂盒适用于蛋白凝胶的快速制备。本试剂盒采用上层胶和下层胶的预混配方,只需将试剂两两混合,加入促凝剂即可凝胶,简便快捷。所配的上层胶带有颜色,方便点样和区分不同凝胶。试剂盒提供的改良型促凝剂APS,具有良好的稳定性和促凝效果,配胶过程中无需添加TEMED。本试剂盒可配制125块mini PAGE胶(以 0.75 mm厚度胶计算)。
产品组分
组 分 |
货号 |
P0105 |
上层胶 A液 |
P0105-1 |
80 ml |
上层胶 B液 |
P0105-2 |
80 ml |
下层胶 A液(10%) |
P0105-3 |
250 ml |
下层胶 B液 |
P0105-4 |
250 ml |
APS |
P0105-5 |
8 ml |
凝胶浓度选择参照
货号 |
试剂盒浓度 |
蛋白最佳分离范围 |
P0065 |
6% |
50-150KD |
P0085 |
8% |
30-130KD |
P0105 |
10% |
20-100KD |
P0125 |
12% |
10-70KD |
P0155 |
15% |
10-55KD |
操作流程:
以制备一块0.75/1.0/1.5 mm的PAGE胶为例。
下层胶配方
凝胶厚度 |
下层胶 A液 |
下层胶 B液 |
APS |
0.75mm |
2.0ml |
2.0ml |
40ul |
1.0mm |
2.7ml |
2.7ml |
60ul |
1.5mm |
4.0ml |
4.0ml |
80ul |
上层胶配方
凝胶厚度 |
上层胶 A液 |
上层胶 B液 |
APS |
0.75mm |
0.5ml |
0.5ml |
10ul |
1.0mm |
0.75ml |
0.75ml |
15ul |
1.5mm |
1.0ml |
1.0ml |
20ul |
1. 各组分在使用前请颠倒混匀6-8次。
2. 下层胶配制:取等体积下层胶A液和下层胶B液,各2.0/2.7/4.0 ml,混匀。
3. 上层胶配制:取等体积上层胶A液和上层胶B液,各0.5/0.75/1.0 ml,混匀。
4. 向步骤2的混合溶液中加入40/60/80 μl的APS,立即充分混匀,然后注入制胶玻璃板中,使液面距短玻璃板上沿约37.5px。
注1:此溶液一般过量,请勿全部注入。
注2:混匀操作避免剧烈振荡,在灌注的过程中避免将气泡灌入制胶玻璃板中。
注3:灌注下层胶后用ddH2O或醇封闭,如操作不熟悉可待下层胶凝固后再灌注上层胶;如操作熟练可以不用等下层胶凝固直接做一下第5步。
5. 向步骤3的混合溶液中加入10/15/20μl的APS,立即充分混匀,如熟练操作可无需等待下层胶凝固,即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中,轻轻插入梳齿。
注:灌注上层胶溶液可沿着长玻璃板轻缓注入,避免将下层胶冲散。
6. 待胶凝固后(室温约20-30 min),拔去梳齿即可用于电泳。
注:请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
建议电压:180-250V(约20-30分钟跑完电泳),如第一次使用可按照80V跑完上层胶,120V跑下层胶。
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做WB申请试用 研究方向: 中医肿瘤
试用产品情况:效果尚可,条带清晰
产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):
实验结果:
后续是否有购买需求:课题组暂时用雅酶,考虑中
课题组研究方向涉及到大量重组蛋白的表达分离纯化及后续应用评价,目前实验室采用各个单组分混合配置SDS-PAGE胶,步骤繁琐且耗时,想申请AB胶试用装,根据使用体验后续反馈给实验室采购负责人相关产品信息以便后续采购。 研究方向: 抗体
试用产品情况:用于15kD左右蛋白的SDS-PAGE实验,实验室之前一直是单组份试剂(约6种)依次按比例混合后先配制下层分离胶后液封,待下层胶凝固后,再注入上层浓缩胶,整个制备过程约一小时左右,繁琐且耗时,进行电泳是需调节电压且总时长较长约1.5h;
产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):该产品分为预混的上层胶AB液、下层胶AB液及促凝剂APS,避免了传统TEMED的毒性,降低实验风险。且预混溶液配制起来方便快捷,可不等待下层胶凝固就可以注入上层胶,并且上层胶为浅粉色、拔掉梳子后上扬孔清晰,可以180V+一次性跑到底,电泳时间也大大缩短。
实验结果:与单组份配置的蛋白胶相比基本无差别,但制胶及跑胶时间大大缩短,节约大量时间和精力。
后续是否有购买需求:课题组同期也有使用单组份制胶液、雅酶的AB预混制胶液及ACE预制胶等,将根据具体使用情况向实验室采购负责人推荐。
配胶有气泡,尝试新产品
试用产品情况:价格便宜、量大。配制出来的胶可供正常使用,marker条带清晰,蛋白样品无拖尾现象。
产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):制作方便,性价比高
实验结果:
理想
后续是否有购买需求:暂无购买需求
做实验 研究方向: 神经药理学
试用产品情况:配胶很方便,与传统配胶相比稳定性感觉更好
产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):目前没有发现什么明显的缺点
实验结果:
后续是否有购买需求:
经常跑电泳,制胶和关键,期待试试这个速制胶试剂盒
试用产品情况:一步法SDS-PAGE AB液快速制胶试剂盒 10%
产品应用中遇到的问题(优点 or 缺点,试用产品评价):制胶方便、快速,不用繁琐配置
实验结果:条带分离清晰
后续是否有购买需求:
本周你还有5次试用机会