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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pQE-80L
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pQE-80L
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0071 | pQE-80L | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 复制子: | Ori |
|---|---|
| 终止子: | Lambda t0 |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体;pQE系列表达质粒 |
| 质粒大小: | 4751bp |
| 质粒标签: | 6*His |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | M15 |
| 诱导方式: | 无需诱导 |
| 5'测序引物: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3'测序引物: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
质粒简介
质粒图谱
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文献和实验蛋白为44KD,融合后应为73KD,但是没有见到表达. 综合分析会是什么原因?该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功,应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧?第1号和3号克隆已测序,表达框没有移码,基因全长正确。测序结果如下,请参考: AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
蛋白是相当重要的;同时可以纯化出那些完整表达的蛋白,一些在翻译过程中容易造成“暂停”现象的蛋白就不用怕纯化产物里含有不完整的产物。融合了6×组氨酸标签的有pQE-60和pQE-70,融合了6×His-DHFR的有pQE-16。 顺式抑制载体 pQE系列的表达载体一般情况下需要在M15菌株中进行表达的,但是设计的pQE80L系列就没有这种约束,它可以在任意大肠杆菌株中进行表达。这与一般的pQE载体利用M15中质粒pREP4的反式lacI抑制子调控不同,它是利用顺式lacIq调控产生大量lac抑制
8.0) PCI (25:24:1) RNase A (1 mg/mL) 1% agarose gel 方法步骤: 1) 由前一天转形所得的转形株中,挑选12~24 个单一菌落,在LB/Amp plate上划数道短的横线或斜线,同时也须要接种带有载体pQE31 的菌株,于37℃培养过夜或直至菌体长出。 2) 以接种环将菌体刮下,悬浊在30 μL 1×NET 中,震荡混合均匀。 ◆ 不要忘了pQE31/JM109! 3) 加入30 μL PCI,剧烈震荡。 4) 以12,000 rpm 离心
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