- ￥750
- 盖宁生物
- 上海
- GN1937
- 2025年12月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pQE-16
- 库存：
现货
- 供应商：
上海盖宁生物
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 低拷贝 |
| 启动子: | T5 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3996 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3' 测序引物及序列: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
| 载体标签: | N-DHFR, N-His |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 备注: |
pQE vectors and constructs can be maintained in any E. coli strain that is ampicillin-sensitive and carries the pREP4 repressor plasmid, or harbors the lacIq gene on the F-factor episome.
|
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 1937 | pQE-16 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
PubMed=23325432; DOI=10.1101/gr.147942.112
Varley K.E., Gertz J., Bowling K.M., Parker S.L., Reddy T.E., Pauli-Behn F., Cross M.K., Williams B.A., Stamatoyannopoulos J.A., Crawford G.E., Absher D.M., Wold B.J., Myers R.M.
Dynamic DNA methylation across diverse human cell lines and tissues.
Genome Res. 23:555-567(2013)
PubMed=23404217; DOI=10.1007/s11626-013-9581-9
Chang D., Xu H.-W., Guo Y.-H., Jiang X., Liu Y., Li K.-L., Pan C.-X., Yuan M., Wang J.-F., Li T.-Z., Liu C.-T.
Simulated microgravity alters the metastatic potential of a human lung adenocarcinoma cell line.
In Vitro Cell. Dev. Biol. Anim. 49:170-177(2013)
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*发表【英文论文】请标注：From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
蛋白为44KD，融合后应为73KD，但是没有见到表达. 综合分析会是什么原因？该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功，应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧？第1号和3号克隆已测序，表达框没有移码，基因全长正确。测序结果如下，请参考： AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
来提高平末端的连接效率。 如果是单酶切，为了防止载体本身的自身连接，可以用牛小肠碱性磷酸酶（CIP）处理，去掉酶切后5'端的磷酸。这样做能有效防止质粒的自身环化，降低转化的背景，大大提高重组子的筛出效率。 连接反应的温度在37℃时有利于连接酶的活性，但是在这样的温度下，粘性末端的氢键结合是不稳定的。一般的连接条件是在12-16℃，反应12-16小时(过夜)，这样既可最大限度地发挥连接酶的活性，又兼顾到粘性末端短暂配对结构的稳定。 连接产物转化宿主细胞后，还须对转化菌落进行筛选鉴定，挑选
蛋白是相当重要的；同时可以纯化出那些完整表达的蛋白，一些在翻译过程中容易造成“暂停”现象的蛋白就不用怕纯化产物里含有不完整的产物。融合了6×组氨酸标签的有pQE-60和pQE-70，融合了6×His-DHFR的有pQE-16。 顺式抑制载体 pQE系列的表达载体一般情况下需要在M15菌株中进行表达的，但是设计的pQE80L系列就没有这种约束，它可以在任意大肠杆菌株中进行表达。这与一般的pQE载体利用M15中质粒pREP4的反式lacI抑制子调控不同，它是利用顺式lacIq调控产生大量lac抑制
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