| 出品公司: | Qiagen |
|---|---|
| 别名: | pQE80L, pQE 80L |
| 质粒类型: | 大肠杆菌蛋白表达载体 |
| 表达水平: | 低拷贝 |
| 启动子: | T5 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 4751 bp |
| 5' 测序引物及序列: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3' 测序引物及序列: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
| 载体标签: | N-His |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 备注: |
QIAexpress pQE vectors and constructs can be maintained in any E. coli strain that is ampicillin-sensitive and carries the pREP4 repressor plasmid, or harbors the lacIq gene on the F-factor episome. Alternatively, thepQE-80L series of expression vectors which encodes a lacIq repression module, allows use of any E. coli host strain. 配套表达菌株为M15[pREP4].
|
| 产品目录号: | ZY32923 |
| 稳定性: | 瞬时表达 Transient |
| 组成型: | 组成型 Constitutive |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥800
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY32923
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pQE-80L
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
pQE80L载体基本信息
pQE80L载体质粒图谱和多克隆位点信息
pQE80L载体简介
pQE80L载体序列
LOCUS pQE-80L 4751 bp DNA Circular SYN
DEFINITION pQE-80L
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4751
/organism="pQE-80L"
/mol_type="other DNA"
gene 346..1005
/label="CAT/CamR"
/gene="CAT/CamR"
CDS 346..1005
/label="ORF frame 1"
terminator 1073..1116
/label="rrnB_T1_terminator"
misc_feature complement(1249..2340)
/label="lacI"
CDS complement(1249..2208)
/label="ORF frame 3"
misc_feature complement(2493..2515)
/label="pGEX_3_primer"
gene complement(3686..4546)
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS complement(3686..4546)
/label="ORF frame 2"
promoter complement(4588..4616)
/label="AmpR_promoter"
ORIGIN
1 CTCGAGAAAT CATAAAAAAT TTATTTGCTT TGTGAGCGGA TAACAATTAT AATAGATTCA
61 ATTGTGAGCG GATAACAATT TCACACAGAA TTCATTAAAG AGGAGAAATT AACTATGAGA
121 GGATCGCATC ACCATCACCA TCACGGATCC GCATGCGAGC TCGGTACCCC GGGTCGACCT
181 GCAGCCAAGC TTAATTAGCT GAGCTTGGAC TCCTGTTGAT AGATCCAGTA ATGACCTCAG
241 AACTCCATCT GGATTTGTTC AGAACGCTCG GTTGCCGCCG GGCGTTTTTT ATTGGTGAGA
301 ATCCAAGCTA GCTTGGCGAG ATTTTCAGGA GCTAAGGAAG CTAAAATGGA GAAAAAAATC
361 ACTGGATATA CCACCGTTGA TATATCCCAA TGGCATCGTA AAGAACATTT TGAGGCATTT
421 CAGTCAGTTG CTCAATGTAC CTATAACCAG ACCGTTCAGC TGGATATTAC GGCCTTTTTA
481 AAGACCGTAA AGAAAAATAA GCACAAGTTT TATCCGGCCT TTATTCACAT TCTTGCCCGC
541 CTGATGAATG CTCATCCGGA ATTTCGTATG GCAATGAAAG ACGGTGAGCT GGTGATATGG
601 GATAGTGTTC ACCCTTGTTA CACCGTTTTC CATGAGCAAA CTGAAACGTT TTCATCGCTC
661 TGGAGTGAAT ACCACGACGA TTTCCGGCAG TTTCTACACA TATATTCGCA AGATGTGGCG
721 TGTTACGGTG AAAACCTGGC CTATTTCCCT AAAGGGTTTA TTGAGAATAT GTTTTTCGTC
781 TCAGCCAATC CCTGGGTGAG TTTCACCAGT TTTGATTTAA ACGTGGCCAA TATGGACAAC
841 TTCTTCGCCC CCGTTTTCAC CATGGGCAAA TATTATACGC AAGGCGACAA GGTGCTGATG
901 CCGCTGGCGA TTCAGGTTCA TCATGCCGTT TGTGATGGCT TCCATGTCGG CAGAATGCTT
961 AATGAATTAC AACAGTACTG CGATGAGTGG CAGGGCGGGG CGTAATTTTT TTAAGGCAGT
1021 TATTGGTGCC CTTAAACGCC TGGGGTAATG ACTCTCTAGC TTGAGGCATC AAATAAAACG
1081 AAAGGCTCAG TCGAAAGACT GGGCCTTTCG TTTTATCTGT TGTTTGTCGG TGAACGCTCT
1141 CCTGAGTAGG ACAAATCCGC CCTCTAGATT ACGTGCAGTC GATGATAAGC TGTCAAACAT
1201 GAGAATTGTG CCTAATGAGT GAGCTAACTT ACATTAATTG CGTTGCGCTC ACTGCCCGCT
1261 TTCCAGTCGG GAAACCTGTC GTGCCAGCTG CATTAATGAA TCGGCCAACG CGCGGGGAGA
1321 GGCGGTTTGC GTATTGGGCG CCAGGGTGGT TTTTCTTTTC ACCAGTGAGA CGGGCAACAG
1381 CTGATTGCCC TTCACCGCCT GGCCCTGAGA GAGTTGCAGC AAGCGGTCCA CGCTGGTTTG
1441 CCCCAGCAGG CGAAAATCCT GTTTGATGGT GGTTAACGGC GGGATATAAC ATGAGCTGTC
1501 TTCGGTATCG TCGTATCCCA CTACCGAGAT ATCCGCACCA ACGCGCAGCC CGGACTCGGT
1561 AATGGCGCGC ATTGCGCCCA GCGCCATCTG ATCGTTGGCA ACCAGCATCG CAGTGGGAAC
1621 GATGCCCTCA TTCAGCATTT GCATGGTTTG TTGAAAACCG GACATGGCAC TCCAGTCGCC
1681 TTCCCGTTCC GCTATCGGCT GAATTTGATT GCGAGTGAGA TATTTATGCC AGCCAGCCAG
1741 ACGCAGACGC GCCGAGACAG AACTTAATGG GCCCGCTAAC AGCGCGATTT GCTGGTGACC
1801 CAATGCGACC AGATGCTCCA CGCCCAGTCG CGTACCGTCT TCATGGGAGA AAATAATACT
1861 GTTGATGGGT GTCTGGTCAG AGACATCAAG AAATAACGCC GGAACATTAG TGCAGGCAGC
1921 TTCCACAGCA ATGGCATCCT GGTCATCCAG CGGATAGTTA ATGATCAGCC CACTGACGCG
1981 TTGCGCGAGA AGATTGTGCA CCGCCGCTTT ACAGGCTTCG ACGCCGCTTC GTTCTACCAT
2041 CGACACCACC ACGCTGGCAC CCAGTTGATC GGCGCGAGAT TTAATCGCCG CGACAATTTG
2101 CGACGGCGCG TGCAGGGCCA GACTGGAGGT GGCAACGCCA ATCAGCAACG ACTGTTTGCC
2161 CGCCAGTTGT TGTGCCACGC GGTTGGGAAT GTAATTCAGC TCCGCCATCG CCGCTTCCAC
2221 TTTTTCCCGC GTTTTCGCAG AAACGTGGCT GGCCTGGTTC ACCACGCGGG AAACGGTCTG
2281 ATAAGAGACA CCGGCATACT CTGCGACATC GTATAACGTT ACTGGTTTCA CATTCACCAC
2341 CCTGAATTGA CTCTCTTCCG GGCGCTATCA TGCCATACCG CGAAAGGTTT TGCACCATTC
2401 GATGGTGTCG GAATTTCGGG CAGCGTTGGG TCCTGGCCAC GGGTGCGCAT GATCTAGAGC
2461 TGCCTCGCGC GTTTCGGTGA TGACGGTGAA AACCTCTGAC ACATGCAGCT CCCGGAGACG
2521 GTCACAGCTT GTCTGTAAGC GGATGCCGGG AGCAGACAAG CCCGTCAGGG CGCGTCAGCG
2581 GGTGTTGGCG GGTGTCGGGG CGCAGCCATG ACCCAGTCAC GTAGCGATAG CGGAGTGTAT
2641 ACTGGCTTAA CTATGCGGCA TCAGAGCAGA TTGTACTGAG AGTGCACCAT ATGCGGTGTG
2701 AAATACCGCA CAGATGCGTA AGGAGAAAAT ACCGCATCAG GCGCTCTTCC GCTTCCTCGC
2761 TCACTGACTC GCTGCGCTCG GTCGTTCGGC TGCGGCGAGC GGTATCAGCT CACTCAAAGG
2821 CGGTAATACG GTTATCCACA GAATCAGGGG ATAACGCAGG AAAGAACATG TGAGCAAAAG
2881 GCCAGCAAAA GGCCAGGAAC CGTAAAAAGG CCGCGTTGCT GGCGTTTTTC CATAGGCTCC
2941 GCCCCCCTGA CGAGCATCAC AAAAATCGAC GCTCAAGTCA GAGGTGGCGA AACCCGACAG
3001 GACTATAAAG ATACCAGGCG TTTCCCCCTG GAAGCTCCCT CGTGCGCTCT CCTGTTCCGA
3061 CCCTGCCGCT TACCGGATAC CTGTCCGCCT TTCTCCCTTC GGGAAGCGTG GCGCTTTCTC
3121 ATAGCTCACG CTGTAGGTAT CTCAGTTCGG TGTAGGTCGT TCGCTCCAAG CTGGGCTGTG
3181 TGCACGAACC CCCCGTTCAG CCCGACCGCT GCGCCTTATC CGGTAACTAT CGTCTTGAGT
3241 CCAACCCGGT AAGACACGAC TTATCGCCAC TGGCAGCAGC CACTGGTAAC AGGATTAGCA
3301 GAGCGAGGTA TGTAGGCGGT GCTACAGAGT TCTTGAAGTG GTGGCCTAAC TACGGCTACA
3361 CTAGAAGGAC AGTATTTGGT ATCTGCGCTC TGCTGAAGCC AGTTACCTTC GGAAAAAGAG
3421 TTGGTAGCTC TTGATCCGGC AAACAAACCA CCGCTGGTAG CGGTGGTTTT TTTGTTTGCA
3481 AGCAGCAGAT TACGCGCAGA AAAAAAGGAT CTCAAGAAGA TCCTTTGATC TTTTCTACGG
3541 GGTCTGACGC TCAGTGGAAC GAAAACTCAC GTTAAGGGAT TTTGGTCATG AGATTATCAA
3601 AAAGGATCTT CACCTAGATC CTTTTAAATT AAAAATGAAG TTTTAAATCA ATCTAAAGTA
3661 TATATGAGTA AACTTGGTCT GACAGTTACC AATGCTTAAT CAGTGAGGCA CCTATCTCAG
3721 CGATCTGTCT ATTTCGTTCA TCCATAGTTG CCTGACTCCC CGTCGTGTAG ATAACTACGA
3781 TACGGGAGGG CTTACCATCT GGCCCCAGTG CTGCAATGAT ACCGCGAGAC CCACGCTCAC
3841 CGGCTCCAGA TTTATCAGCA ATAAACCAGC CAGCCGGAAG GGCCGAGCGC AGAAGTGGTC
3901 CTGCAACTTT ATCCGCCTCC ATCCAGTCTA TTAATTGTTG CCGGGAAGCT AGAGTAAGTA
3961 GTTCGCCAGT TAATAGTTTG CGCAACGTTG TTGCCATTGC TACAGGCATC GTGGTGTCAC
4021 GCTCGTCGTT TGGTATGGCT TCATTCAGCT CCGGTTCCCA ACGATCAAGG CGAGTTACAT
4081 GATCCCCCAT GTTGTGCAAA AAAGCGGTTA GCTCCTTCGG TCCTCCGATC GTTGTCAGAA
4141 GTAAGTTGGC CGCAGTGTTA TCACTCATGG TTATGGCAGC ACTGCATAAT TCTCTTACTG
4201 TCATGCCATC CGTAAGATGC TTTTCTGTGA CTGGTGAGTA CTCAACCAAG TCATTCTGAG
4261 AATAGTGTAT GCGGCGACCG AGTTGCTCTT GCCCGGCGTC AATACGGGAT AATACCGCGC
4321 CACATAGCAG AACTTTAAAA GTGCTCATCA TTGGAAAACG TTCTTCGGGG CGAAAACTCT
4381 CAAGGATCTT ACCGCTGTTG AGATCCAGTT CGATGTAACC CACTCGTGCA CCCAACTGAT
4441 CTTCAGCATC TTTTACTTTC ACCAGCGTTT CTGGGTGAGC AAAAACAGGA AGGCAAAATG
4501 CCGCAAAAAA GGGAATAAGG GCGACACGGA AATGTTGAAT ACTCATACTC TTCCTTTTTC
4561 AATATTATTG AAGCATTTAT CAGGGTTATT GTCTCATGAG CGGATACATA TTTGAATGTA
4621 TTTAGAAAAA TAAACAAATA GGGGTTCCGC GCACATTTCC CCGAAAAGTG CCACCTGACG
4681 TCTAAGAAAC CATTATTATC ATGACATTAA CCTATAAAAA TAGGCGTATC ACGAGGCCCT
4741 TTCGTCTTCA C
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文献和实验相关实验
蛋白为44KD，融合后应为73KD，但是没有见到表达. 综合分析会是什么原因？该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功，应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧？第1号和3号克隆已测序，表达框没有移码，基因全长正确。测序结果如下，请参考： AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
蛋白是相当重要的；同时可以纯化出那些完整表达的蛋白，一些在翻译过程中容易造成“暂停”现象的蛋白就不用怕纯化产物里含有不完整的产物。融合了6×组氨酸标签的有pQE-60和pQE-70，融合了6×His-DHFR的有pQE-16。 顺式抑制载体 pQE系列的表达载体一般情况下需要在M15菌株中进行表达的，但是设计的pQE80L系列就没有这种约束，它可以在任意大肠杆菌株中进行表达。这与一般的pQE载体利用M15中质粒pREP4的反式lacI抑制子调控不同，它是利用顺式lacIq调控产生大量lac抑制
8.0） PCI （25:24:1） RNase A （1 mg/mL） 1% agarose gel 方法步骤： 1） 由前一天转形所得的转形株中，挑选12~24 个单一菌落，在LB/Amp plate上划数道短的横线或斜线，同时也须要接种带有载体pQE31 的菌株，于37℃培养过夜或直至菌体长出。 2） 以接种环将菌体刮下，悬浊在30 μL 1×NET 中，震荡混合均匀。 ◆ 不要忘了pQE31/JM109! 3） 加入30 μL PCI,剧烈震荡。 4） 以12,000 rpm 离心
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pQE-80L载体
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