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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
半年
- 英文名:
pQE-80
- 库存:
200
- 供应商:
沪震生物
- 规格:
5ug
pQE-80
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 优惠价 |
|---|---|---|---|
| HZ0633 | pQE-80 | 20μl |
¥请询价 |
使用说明
基本信息
| 启动子: | T5 |
|---|---|
| 复制子: | ColE1 ori |
| 终止子: | Lambda t0 terminator;rrnB T1 |
| 质粒分类: | 大肠杆菌载体;pQE系列表达质粒 |
| 原核抗性: | 氨苄青霉素Amp |
| 克隆菌株: | DH5α |
| 培养条件: | 37℃,有氧,LB |
| 表达宿主: | M15 |
| 诱导方式: | IPTG或乳糖及其类似物 |
| 5'测序引物: | pQE30-F: AGCGGATAACAATTTCACACAG |
| 3'测序引物: | pQE30-R: TTCTGAGGTCATTACTGGATC |
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文献和实验蛋白为44KD,融合后应为73KD,但是没有见到表达. 综合分析会是什么原因?该蛋白国外已在pQE30载体上表达成功,应该不会是稀有密码的原因造成表达终止吧?第1号和3号克隆已测序,表达框没有移码,基因全长正确。测序结果如下,请参考: AAATCGGATCTGGTTCCGCGTGGATCCCCGGAATTCCCGGGTCGACATGATACAAGTACTGATGGCTGCTGCAAGCTTTG
时有助于保持稳定6×组氨酸DHFR标签在小鼠和大鼠中的免疫原性不高,所以与之融合的重组蛋白不需要把标签切除,可以直接进行免疫或者表位测图QIAexpress系列都是用pQE载体进行的,作为德国出品的东西,它具有德国人一贯的严谨性,各方面都考虑得比较周全。pQE载体都是以T5启动子起始转录-翻译系统的,pQE 是pDS家族的一员,来源于pDS56/RBSII和pDS781/RBSII-DHFRS。这些低拷贝质粒都有以下特征:优化的启动子-操纵元模式,包括来自噬菌体的T5启动子(由大肠杆菌的RNA
反应过夜。 3. 反应完毕后取5mL pQE-31质粒的酶切液做电泳分析,检验酶切是否完全。酶切完全,进行下一步。 4. 将酶切处理的后pQE-31和pUC18-CAT 质粒,分别上样跑琼脂糖凝胶电泳(注意加DNA分子量标准)。电泳结束后用DNA琼脂糖胶纯化试剂盒按照试剂盒说明书的方法回收DNA片段。前者回收的片段为3.5kb,后者为650bp。 5. 将回收的pQE-31载体质粒均分为两份,其中一份与酶切后回收的CAT片段混合,做连接;另一份不加CAT片段,做对照。操作如下:
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