载体pBABE-Puro

常用载体元件介绍及病毒载体应用

1.常用载体分类：2,常用载体元件介绍：(1) 启动子：启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。启动子主要分为广谱启动子和特异性启动子。广谱启动子为在各种组织、细胞上广泛表达的启动子；特异性启动子为在特异性组织或者细胞类型上表达的启动子。常用广谱启动子有CAG，CMV，EF1a，PGK等，还包含启动RNA的III型启动子U6和H1启动子；常用特异性启动子如成熟神经元特异性启动子hSyn，投射神经元特异性启动

【原创】表达载体的选择及构建方法

型质粒 （3）必需具备一个以上的酶切位点，有选择的余地； （4）必需有易检测的标记，多是抗生素的抗性基因，不特指多位 Ampr（试一试）。 （5）满足自己的实验需求，是否需要包装病毒，是否需要加入荧光标记，是否需要加入标签蛋白，是否需要真核抗性（如Puro、G418）等等。 无论选用哪种载体，首先都要获得载体分子，然后采用适当的限制酶将载体 DNA 进行切割，获得线性载体分子，以便于与目的基因片段进行连接。 如何阅读质粒图谱 第一步：首先看 Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核

【求助】怎样判断在一个细胞中同时了导入两个含GFP标记的慢病毒过表达载体？感谢高手指点！

)，但这样我又担心导进去后基因不一定都表达，担心会不会受其他调控表达的机制的影响，比如甲基化等表观遗传学的影响。 希望哪位高手能为在下指点迷津，非常感激！ kinguangjun 你好！你可以一个慢病毒过表达载体用GFP，另一个慢病毒过表达载体用RFP来标记，这样就可以解决你的问题。 zhujoker 你其实可以使用一个带GFP的，一个带PURO抗性的载体不就ok了？两个放在一起也是可以的，其实应该说是更好，因为其表达