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上海中科新生命生物科技有限公司
红外光谱分析测试
■ 实验原理
红外光谱是鉴定有机化合物结构的重要方法,具有样品用量小和不需要高纯晶体等特点,研究生物大分子,蛋白质等的结构、构象,除能获得有关组分信息外,用傅里叶变换红外光谱方法研究蛋白质和多肽的二级结构,主要是对其红外光谱中酰胺Ⅰ谱带(氘代后,称酰胺Ⅰ谱带)进行分析。酰胺Ⅰ谱带为α-螺旋、β-折叠,无规卷曲和转角等不同结构振动峰的加和带,彼此重叠,在40500px-1-42500px-1范围内通常为一个不易分辨的宽谱带,目前常应用去卷积、微分等数学方法,使加合带中处于不同波数的α-螺旋、β-折叠,无规卷曲等各个吸收峰得以分辨,最后经谱带拟合,获得各个吸收峰的定量信息。
■ 实验原理
Spectrum RX Ι, Perkin Elmer
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文献和实验一定频率的红外光辐照能导致被照射物质分子在振动、转动能级上的跃迁。当分子中某些化学键或基团(具有偶极特性)的振动频率与红外辐射的频率一致时,分子便吸收此红外辐射(一种共振吸收)。若以频率连续改变的红外光辐照试样,由于试样对不同频率的红外光的吸收不同,便得到以吸光度 A 或透光率 T 为纵坐标,红外辐射波数或波长为横坐标的红外光谱图。 一个分子的振动涉及到多个原子的共同运动,它分为延着化学键的伸缩和弯曲两类振动方式。其振动频率主要决定于原子的质量与化学键的强度。质量越
红外光谱法广泛用于有机化合物的定性鉴定和结构分析。 一、定性分析 1 . 已知物的鉴定 将试样的谱图与标准的谱图进行对照,或者与文献上的谱图进行对照。如果两张谱图各吸收峰的位置和形状完全相同,峰的相对强度一样,就可以认为样品是该种标准物。如果两张谱图不一样,或峰位不一致,则说明两者不为同一化合物,或样品有杂质。如用计算机谱图检索,则采用相似度来判别。使用文献上的谱图应当注意试样的物态、结晶状态、溶剂、测定条件以及所用仪器类型均应与标准谱图相同。
近红外光谱分析应用方式的特点:近红外光谱的工作谱区信息量丰富,对样品有较强的透过能力。近红外光谱分析能在几秒钟内对被测样品完成一次光谱的采集测量,瞬间即可依靠数学模型完成其多项性能指标的测定。分析过程不产生污染、不消耗其它材料、不破坏样品,分析重现性好、成本低;可以实现快速分析、绿色分析、廉价分析,具有“多、快、好、省”的特点。尤其是在复杂物、天然物的无损、微损分析、在线分析、原位分析、瞬间分析等领域具有常规分析无法比拟的优点。近红外光谱分析技术对于适时的质量监控与大量样品分析是十分经济且快速
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