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- 2026年01月26日
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上海中科新生命生物科技有限公司
蛋白质药物等电点测试原理：两性电解质在电泳场中形成pH梯度，由于蛋白质为两性化合物，其所带的电荷与介质pH指有关，带点蛋白质在电泳中向极性相反的方向迁移，当到达其等电点时，电流达到最小，蛋白质不再移动，此处的pH值为该蛋白质样品的等电点，与标准品对比后可以进行定量计算，获取蛋白质样品的等电点参数。
“平板等电聚焦测定蛋白质的等电点，是中国药典中规定的方法”
技术指标
■ 样品要求：
测试样品中尽可能无盐或低盐；样品纯度在90%以上
■ 仪器设备：
MultiphorⅡ Electrophoresis System (GE Healthcare)：内置陶瓷冷却板（260×200 mm）与循环水直接相连，电泳胶直接置于冷却板上，温控效果好。
EPS 3501 XL Power Supply（GE Healthcare）：输出电压（0-3500V）；输出电流（0-400mA）；输出功率（0-200W）；恒压、恒流、恒功率之间可以自动切换。
案例分析
样品名称：重组XXXXXXXX蛋白
样品批号：XXXXXXXXXXXXXX
平板等电聚焦电泳试验参数：上样量10μg
冷凝温度：9℃
电泳程序：预电泳700V 20min；500V 20min；200V 90min。
结果图片：
Q&A
- 蛋白质的平板等电聚焦和毛细管等电聚焦方法比较。
- 平板等电聚焦在蛋白质类药物理化性质分析中的地位。
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文献和实验在生物实验中相信大家都经常要倒平板，细菌培养，分子生物学实验等等。医药企业中倒平板更是家常便饭，环境监测、水监测、微生物检查等，初学者往往都倒不好，我们总结几点小技巧供大家参考。 一、防止倒皿时的冷凝 有经验的都知道，手心不烫手背烫，这是一个经验数据，此时的温度在 45 度左右，最适合倒平板。 如果要连续倒多个皿，尤其是在冬天往往容易凝固，一旦凝固则需要再加热到较高温度才能融化（玻璃体的特性）。所以建议此时有个 50 度的恒温水浴开着，随时把装培养基的三角
一、目的： 学习聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点的原理及方法。二、原理： 等电点聚焦（isoelectric focusing，IEF）或简称电聚（electrofocusing），也曾称等电点分离聚焦电泳等。它是60年代中期出现的技术，克服了一般电泳易扩散的缺点。近年来，等电点聚焦电泳又有了新的进展，可以分辨等电点只差0.001pH单位的生物分子。由于它的分辨力高、重复性好、样品容量大、操作简便、迅速，在生物化学、分类学、分子生物学及临床医学研究等诸方面，都得到广泛应用。等电
vera21173 我研究的是一个基因对肿瘤细胞增殖的影响，上调这个基因的表达可以促进细胞增殖（CCK-8和平板集落形成实验的结果一致），下调这个基因的表达可以抑制细胞增殖。但有平板集落形成实验有一个奇怪的现象，稳转这个基因的细胞集落形成数量明显比空载细胞多，但集落大小比空载细胞小很多，镜下观察发现空载细胞形成的集落中的细胞很分散，而稳转目的基因的细胞集落中细胞很紧密。请问这能说明什么问题？ zhouyongchun_1
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