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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Zero background flat end fast connection kit(without mcs)
- 库存:
567
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
20次|40次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售平末端克隆试剂盒厂家直销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:平末端克隆试剂盒厂家直销
规格:20次|40次
英文名:Zero background flat end fast connection kit(without mcs)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:ALH341
本试剂盒是一种先进的自杀基因阳性选择克隆系统,可以高效克隆平末端 PCR 产物和任何具有平末端的DNA 片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的 DNA 片段都有效。 阳性选择载体和插入片段连接仅需 5 分钟即可获得超过 90%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶(如:Pfu polymerase)扩增的平末端 PCR 产物可直接连入克隆载体。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。
本试剂盒提供一个新颖的自杀基因阳性选择克隆载体。该载体含有致死的自杀基因,当载体与片段连接成功,自杀基因无法正确表达,包含重组子的细胞可以正常生长;当载体与片段连接不成功,载体自连后自杀基因正确表达,包含自连空载体的细胞无法存活,即“零ZERO”背景。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选,极大地加速了克隆筛选进程。
本试剂盒载体消除了插入位点附近的多克隆酶切位点,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时,酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。
试剂盒组份(20次):
平末端Simple Vector(40ng/μl)——————————20μl
1000bp Control(40ng/μl)-———————————5μl
2×Quick Ligation Buffer-————————————100μl
T4 DNA ligase(5U/μl)—————————————20μl
Forward Sequencing Primer (10μM)————————100μl
Reverse Sequencing Primer (10μM)————————100μl
注:
forward sequencing primer, 23-mer 5’-CGACTCACTATAGGGAGAGCGTC- 3’
reverse sequencing primer, 24-mer 5’-AAGAACATCGCTTTTCGATGGCAG- 3’
储存条件:-20℃,有效期6个月。
本品别名:平末端载体连接试剂盒(不含多克隆位点)(T4连接酶技术)|平末端克隆试剂盒
我公司的平末端克隆试剂盒厂家直销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·热启动Taq PCR MasterMix
编号:ALH249
英文名称:2×HotStart Taq PCR MasterMix
规格:0.5ml|5ml
本产品包含HotMaster Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。HotMaster Taq DNA polymerase 采用了国际上最新独特的合成亲和性配体技术,该配体可以以一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。该酶与一般Hot-start 酶不同之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而HotMaster Taq DNA 聚合酶利用抑制性配体通过温度调节方式封闭HotMasterTaq DNA 聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的精确性。本产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×HotMaster Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀。
产品组份:HotMaster Taq DNA Polymerase:0.05units/μl ;MgCl2: 4mM ;dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP):0.4mM;稳定剂;增强剂。
储存条件:-20℃。
平末端克隆试剂盒厂家直销关键词:平末端载体连接试剂盒(不含多克隆位点)(T4连接酶技术),平末端克隆试剂盒
PY04-045 复达欣/头孢他啶 0.8mg/支×10支 每支添加于100mlPALCAM培养基基础中,用于李斯特氏菌的选择性分离培养
BL0643 苯基-琼脂糖凝胶CL-4B Phenyl -Sepharose CL-4B
ARB10736 人纤维连接素相关抗原(FRA)Elisa方法检测 Human fibronection related antigen,fra ELISA KIT
ARB12664 大鼠碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)Elisa分析 Rat basic fibroblast growth factor 4,bfgf-4 ELISA KIT
D-地衣酸 Phenosafranine 7562-61-0
BTN100910 长效期SDS-PAGE还原剂 SDS-PAGE Reducing Agent
SJ0697 超低分子量蛋白Marker Ⅱ (3.5-26.6kD)
BTN131104 Western封堵液 Western Blocking Solution
SJ0298 Glufosinate-ammonium 草铵膦
64-86-8 秋水仙碱 Colchicine
加替沙星 5′-AMP 112811-59-3
7585-39-9 β-环糊精/β-环状糊精
ARB13584 兔子孕激素/孕酮(PROG)血清中含量检测 Rabbit progesterone,prog ELISA KIT
ARB13893 猪传染性胸膜肺炎(PCP)代做ELISA实验
ARB11381 人总胆固醇(TC)ELISA检测服务 Human total cholesterol,tc ELISA KIT
BL1339 ECL Plus荧光检测试剂(ECL超敏发光液)
ARB11053 人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)酶免分析 Human membrane igm,migM ELISA KIT
ARB13886 猪主要急性期蛋白(MAP)Elisa方法检测 Porcine map ELISA KIT
C1301 豚鼠血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml
平末端克隆试剂盒厂家直销关键词:平末端载体连接试剂盒(不含多克隆位点)(T4连接酶技术),平末端克隆试剂盒
·miRNA对应cDNA第一链合成试剂盒
编号:ALH189
英文名称:First strand synthesis kit of cDNA corresponding to miRNA
规格:25次
本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A 尾Poly(A),再使用Anchored oligo(dT)通用逆转录引物进行逆转录反应,最终生成miRNA 对应的cDNA 第一链。miRNA cDNA 第一链合成试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)修饰过程和逆转录过程的所有试剂,该试剂盒具有高效的Poly(A)修饰和逆转录效率, 可从20pg-2μg 的total RNA 中有效制备miRNA对应的cDNA 第一链。一次合成的cDNA可检测多个microRNA,节约了样品和成本。(该试剂盒可与miRNA荧光定量PCR检测试剂盒(ALH190)配套使用。)
试剂盒组分(25次):
E.coli Poly(A) Polymerase(5U/μl)————————50U
10 × Poly(A) Polymerase Buffer—————————100μl
10 × rATP solution———————————————50μl
25μmol RT primer————————————————50μl
RTase (200U/μl)-————————————————5000U
5×RT Reaction Mix-———————————————200μl
RNase free H2O-—————————————————1ml
注意事项:
用本试剂盒合成得到的cDNA模板用于下游PCR或者荧光定量PCR检测时,可以根据实际情况选择使用量,如果发现有非特异扩增条带,或者融链曲线显示有非特异扩增,往往提示cDNA模板过量, 可以将上述cDNA模板稀释几十到几百倍甚至上千倍再使用。
储存条件:-20℃。
·miRNA荧光定量PCR检测试剂盒
编号:ALH190
英文名称:miRNA fluorescent quantitative PCR detection kit
规格:50μl×50次
本试剂盒采用SYBR Green I 嵌合荧光法的原理进行miRNA 荧光定量检测。本试剂盒包含miRNA 荧光定量检测的所有试剂,包括2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。2×miRNA qPCR Mix(含Sybr Green)是专门为miRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR 检测试剂,其中的DNA polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式, 配合特殊的Buffer 体系,使反应特异性更好,灵敏度更高,并能在更广的范围内进行准确定量。(该试剂盒须与miRNA对应cDNA第一链合成试剂盒(ALH189)配套使用。)
试剂盒组分(25次):
2 x miRNA qPCR Mix(With Sybr Green)———————1.25 ml
Reverse primer(10μM)——————————————55μl
需自备的试剂:
1. 分子生物学实验级别的水(无核酸酶)
2. 待检测miRNA对应的qPCR上游引物(Forward primer)
Forward Primer设计原则:
1. 遵循引物设计的最普遍原则。
2. 以成熟的miRNA 序列为基础,将U替换成T,这是最基础和最简单的设计方法。
3. 试剂盒中提供的下游引物的Tm 值为65℃,设计上游引物的Tm 值要尽量保证在65℃左右。
4. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过低,可以在引物的5’端添加几个碱基(最好为G或C碱基);也可以在’3端添加1 个或几个A 碱基;或者5’端和3’端同时修饰。
5. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过高,可以在引物的5’或3’端去掉几个碱基。
注意事项:
1. miRNA 第一链cDNA 的加入量不要超过real time PCR 体积1/10。
2. 对于特殊的检测体系中,高含量的cDNA 模板易导致非特异性扩增,根据所检测miRNA 的丰度适当的稀释cDNA(10倍或者100倍)。
3. 本品中含有荧光染料Sybr Green,I保存本品或配制PCR 反应液时应避免强光照射。
4. 2×miRNA qPCR Mix不含参比染料ROX,客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX参比染料,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
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