粘附载玻片

附录二　原位杂交组织化学常用试剂及处理

，并避免接触皮肤。②含有Tris缓冲液的溶液中，不能加入DEPC。 （二）载玻片的处理 组织原位杂交，常在载玻片上进行，故载玻片的洗涤至关重要，必须保持清洁，并且不能有任何核酸的污染。处理方法如下： （1）先经洗衣粉浸泡过夜，次日自来水冲洗后，泡酸数小时以上，取出后再用流水冲洗，双蒸水冲洗2～3次，置160℃以上烤箱中烧烤4h以上，或经15磅高压灭菌20min。经以上处理可清除载片上的核酸酶。 （2）HCl处理法 （三）硅化

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Spatial玻片兼容；对于≤6.5 x 6.5 mm的组织，从组织周围去除多余的石蜡，使其不大于捕获区域就好，并且还能保留组织样本周围的石蜡边缘，以增强组织在玻片上的附着力；对于>6.5 x 6.5 mm的组织，用刀片切掉多余的部分，形成适合捕获区域的样本，但是由于可能会出现组织裸露，边缘没有石蜡包裹，不利于组织粘附，并且在切掉多余的组织的时候可能还会导致组织损伤和解体。所以最好是在组织包埋的时候就要修剪好组织大小，以便适合捕获区域。   样本取材包埋成石蜡块以后，尽量放在低温保存，有研究表明，低温更

Visium空间基因表达解决方案-冰冻切片制备指南

。   b.一旦获得所需的组织切片，用低温恒温刷轻轻接触周围的OCT，小心地将其展平。 c.将切片置于预平衡的Visium玻片上的捕获区域内，方法是将切片与玻片的表面轻轻接触。 注意：不要把组织切片放在室温的玻片上。玻片应平衡到低温恒温室的温度。避免载玻片的活性表面与低温箱接触，因为这会破坏寡核苷酸并降低Visium玻片的捕获效率。 d.立即将手指放在玻片的背面几秒钟，让切片与玻片粘在一起。 注意：确保整个组织切片完全附着于载玻片上，在整个切片放置过程中玻片放置于低温恒温器腔内。切片和组织