上海晶安J06001圆形细胞爬片，细胞培养盖玻片，多聚赖氨酸

Hoechst染色的讨论

，或手动晃动。 D.用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。 E.将切片置于载玻片上，滴一滴抗淬灭封片液，盖上一洁净的盖玻片，尽量避免气泡。 F.荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长在350nm左右，发射波长在460nm左右，详细图谱请参考下图。 Hoechst 33258的吸收光谱和发射光谱，左侧峰为吸收光谱，右侧峰为发射光谱。细胞爬片后，用Hoechest染色，需要固定吗 littlesilly：对于爬片的细胞，用HE染色前，一定需要进行固定吗？有的文献说

pc12培养

)+15% calf serum(Hyclone)，细胞生长比较理想！ 丁香园silentscope的观点： 1.多聚赖氨酸一般用PBS或BSS配置成10倍质量的工作储存溶液（0.5mg/mL），使用时再稀释成工作浓度（0.05mg/mL），包被flask的过程如下： 1）将工作浓度的多聚赖氨酸溶液加入到培养容器内，一般要求覆盖或湿润培养器皿的生长面即可，若要包被盖玻片，可将盖玻片直接置入盛有多聚赖氨酸工作液的容器内； 2）包被时间为37℃静置2～4h或室温过夜（倾向于包被

常用细胞凋亡检测方法（图）

7.2）的塑料培养瓶（或培养皿）中。 3、置37℃、5%CO2细胞培养箱中培养。 4、细胞接种后，每2-3天换液一次。每次更换约2/3的培养液，并在倒置显微镜下观察PC12细胞是否贴壁。 5、80-90%融合时，用0.25%胰蛋白酶溶液消化，D-Hank’s液收集细胞，调整细胞数。转种到6孔培养板中（可以先用多聚赖氨酸包被）。接种密度为5×105/ml.孵育48h后作为实验细胞。（有人每周按1：4传代）。如准备用于激光共聚焦显微镜照相，可先将处理过的24mm×24mm盖玻片，再转种细胞到6孔