手机验证
询价列表
暂时没有已询价产品
微信扫一扫分享
分享到新浪微博
分享到丁香园论坛
pLB 零背景快速连接试剂盒(
企业认证
20次
购买pLB 零背景快速连接试剂盒(VT205-12)赠送TOP10 感受态细胞(CB104-02)或DH5a 感受态细胞(CB101-02)产品简介
pLB零背景快速克隆试剂盒是一种阳性选择克隆系统,可以高效克隆各种PCR产物和任何具有平末端或粘性末端的DNA片段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的DNA片段都有效。阳性选择载体和插入片段连接仅需5 min即可获得超过95%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶(如:Pfu Polymerase)扩增的平末端PCR产物可直接连入克隆载体。由无校正活性的聚合酶(如:Taq Polymerase)或聚合酶混合物扩增的PCR产物在连接前需用试剂盒提供的热稳定DNA平端化酶进行末端平端化(7 min)即可。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。
试剂盒提供一个新颖的即用型阳性选择克隆载体pLB Vector。该载体含有致死基因(内含多克隆位点),多克隆位点插入外源片段会引起基因失活,因此只有转化了重组质粒的细菌才能存活形成克隆菌落。而自身环化的pLB Vector表达致死的毒性蛋白(无外源片段插入),转化后杀死大肠杆菌细胞。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选,极大地加速了克隆筛选进程。
产品特点
高效快速:零背景无需蓝白斑筛选,5 min快速连接
灵敏广泛:适合低浓度片段和长片段连接,适合平/粘末端连接
不同片段使用量
1.载体与片段的摩尔比控制在1:3-1:10,对于1kb以下的片段建议使用1:3的比例,1kb以上的片段建议使用1:7的比例。
2.请根据凝胶电泳或紫外分光光度计检测后的浓度和片段长度来计算其摩尔比。插入片段用量,可根据以下公式粗略计算:
连接体系中35ng的载体,不同大小的PCR产物最佳加入量举例如下:
PCR产物长度(bp)
最佳的使用量(ng)
700 bp
25 ng
2000 bp
165 ng
pLB Vector图谱
反应体系
标准体系为10 μl体积,5 μl的反应体系也能取得很好的效果,试剂用量减半。
保存条件
请将试剂盒置于-20℃保存,避免反复冻融。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
资料下载:
VT205-140512.pdf 附件下载 (下载 13 次)
请 [登录] 后再下载!
需要更多技术资料 索取更多技术资料
VT205-140512.pdf 附 (下载 13 次)
马上登录 或注册,即可保存询价历史