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天根生化科技(北京)有限公司
- 规格:
10 μl×20 rxn
pLB 零背景快速克隆试剂盒是一种阳性选择克隆系统。试剂盒提供一种新颖的即用型阳性选择克隆载体 pLB,该载体含有致死基因,多克隆位点处插入外源片段会导致该基因失活,而自身环化的 pLB 载体则会表达致死的毒性蛋白。因此,转化后只有含有重组质粒的细菌才能存活形成克隆菌落,从而无需蓝白斑筛选。克隆位点两端均包含Bgl Ⅱ酶切位点,可进行单酶切鉴定阳性克隆。
■ 方便:自连致死的零背景载体,无需蓝白斑筛选
■ 快速:独特连接体系,5 分钟快速连接≤ 3 kb 片段
■ 高效:菌落数多,阳性率接近100%
■ 灵敏:可实现浓度低至 0.05 pmol 及长至 8 kb 片段的高效连接
■ 普适:包含高效平端化酶,平 / 粘末端产物均可连接
感受态细胞



不同长度片段连接菌液检测结果图
连接不同大小片段的阳性率检测。700 bp 片段加入量为12.5 ng,2 kb 片段加入量为23 ng,4 kb 片段加入量为100 ng,8 kb 片段加入量为300 ng。
M: TIANGEN Marker III

平末端长片段连接——菌落数
平末端长片段连接菌落数。连接体系中,载体加入1 μl(35 ng),片段与载体的摩尔比7:1。≤ 3 kb 片段,室温(22℃ ) 连接5 min;> 3 kb片段,室温(22℃ ) 连接30 min。* 百分数代表菌斑检测的阳性率。

粘末端 低浓度片段连接——菌落数
粘末端低浓度片段连接菌落数。连接体系中,700 bp 片段加入量12.5 ng,2 kb 片段加入量23 ng,片段与载体的摩尔比1:1,室温(22 ℃ )连接5 min。* 百分数代表菌斑检测的阳性率。
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