- ￥780
- TIANGEN
- 北京
- VT206
- 2025年12月09日
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- 技术资料
- 保存条件：
-30~-15℃
- 保质期：
1 年
- 英文名：
Lethal Based Simple Fast Cloning Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
天根生化科技（北京）有限公司
- 规格：
20次
pLB 零背景快速克隆试剂盒是一种阳性选择克隆系统。试剂盒提供一种新颖的即用型阳性选择克隆载体 pLB，该载体含有致死基因，多克隆位点处插入外源片段会导致该基因失活，而自身环化的 pLB 载体则会表达致死的毒性蛋白。因此，转化后只有含有重组质粒的细菌才能存活形成克隆菌落，从而无需蓝白斑筛选。克隆位点两端均包含Bgl Ⅱ酶切位点，可进行单酶切鉴定阳性克隆。
■ 方便：自连致死的零背景载体，无需蓝白斑筛选
■ 快速：独特连接体系，5 分钟快速连接≤ 3 kb 片段
■ 高效：菌落数多，阳性率接近100%
■ 灵敏：可实现浓度低至 0.05 pmol 及长至 8 kb 片段的高效连接
■ 普适：包含高效平端化酶，平 / 粘末端产物均可连接
感受态细胞，氨苄青霉素
连接不同大小片段的阳性率检测。700 bp 片段加入量为12.5 ng，2 kb 片段加入量为23 ng，4 kb 片段加入量为100 ng，8 kb 片段加入量为300 ng。
M: TIANGEN Marker III
平末端长片段连接菌落数。连接体系中，载体加入1 μl(35 ng)，片段与载体的摩尔比7:1。≤ 3 kb 片段，室温(22℃ ) 连接5min；＞ 3 kb 片段，室温(22℃) 连接30 min。* 百分数代表菌斑检测的阳性率。
粘末端低浓度片段连接菌落数。连接体系中，700 bp 片段加入量12.5 ng，2 kb 片段加入量23 ng，片段与载体的摩尔比1:1，室温(22 ℃ )连接5 min。* 百分数代表菌斑检测的阳性率。
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文献和实验[1] Liu X, Xu Y, Di J, et al. The triterpenoid saponin content difference is associated with the two type oxidosqualene cyclase gene copy numbers of Pulsatilla chinensis and Pulsatilla cernua[J]. Frontiers in Plant Science, 2023, 14: 1144738.
[2] Zhu F, Ye Q, Chen H, et al. Multigene editing reveals that MtCEP1/2/12 redundantly control lateral root and nodule number in Medicago truncatula[J]. Journal of experimental botany, 2021, 72(10): 3661-3676.
[3] Xu P, Li X, Fan J, et al. An arginine-to-histidine mutation in flavanone-3-hydroxylase results in pink strawberry fruits[J]. Plant Physiology, 2023, 193(3): 1849-1865.
