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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20度
- 保质期:
有效期1年
- 英文名:
Hieff Clone Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
20 T(10908ES20)
产品描述:
本试剂盒是利用拓扑异构酶(Topoisomerase)高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成,与传统的T4连接酶相比,具有以下优势:
1)快速,仅需 1-5 min即可完成连接反应;
2)高效,无自连,阳性克隆率接近100%,无需设置蓝白斑筛选;
3)操作简单,从连接到涂板仅需 15-20 min。操作过程省去冰浴、热激和1 h复苏;
4)可连接长达5 kb目的产物;
5)Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit不含多克隆酶切位点(MCS),在引入后续酶切位点进行酶切操作时,不会受到MCS位点的影响,从而增加酶切效率以及克隆成功率。
产品属性:
| 片段长度 | ≤5kb |
| 片段数量 | 1个 |
| 应用 | 分子克隆 |
| 片段类型 | A尾PCR产物 |
| 反应速度 | 5min |
产品特色:
- 快速、高效、操作简单、后续不受MCS位点影响
储存条件:
冰袋运输。-20℃保存,避免反复冻融。有效期一年。
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文献和实验[2] Zhang W, Sun X, Wei X, Gao Y, Song J, Bai Y. Geography-Driven Evolution of Potato Virus A Revealed by Genetic Diversity Analysis of the Complete Genome. Front Microbiol. 2021;12:738646. Published 2021 Oct 1. doi:10.3389/fmicb.2021.738646(IF:5.640)
[3] Papolu PK, Ramakrishnan M, Wei Q, et al. Long terminal repeats (LTR) and transcription factors regulate PHRE1 and PHRE2 activity in Moso bamboo under heat stress. BMC Plant Biol. 2021;21(1):585. Published 2021 Dec 9. doi:10.1186/s12870-021-03339-1(IF:4.215)
[4] Fang Y, Tambo E, Xue JB, Zhang Y, Zhou XN, . Molecular Analysis of Targeted Insecticide Resistance Gene Mutations in Field-Caught Mosquitos of Medical Importance From Saudi Arabia. J Med Entomol. 2021;58(4):1839-1848. doi:10.1093/jme/tjab048(IF:2.278)
后都只是平端产物。这种平端克隆往往效率低,并且有非特异性背景菌落产生,造成筛选困难。Topo平端克隆主要改良载体设计,把ccdB (Control of cell death)基因并入到mcs中,如果没有DNA片断插入,ccdB基因则会表达,ccdB基因的表达蛋白,会破坏细菌的DNA gyrase,造成细菌染色体的降解导致细菌死亡。如果有插入片断,则ccdB基因表达受到阻碍,所以细胞可生长。这样可以把高背景的缺点改善,节省筛选的时间。Topo平端克隆与Topo TA方法一样,操作简单快速。Zero
PCR Cloning Kit)(Topo XL PCR Cloning Kit) 因为越来越多高确限度热稳定酶如Pfx、Pfu被用于PCR 扩增,使到PCR 后都只是平端产物。这种平端克隆 往往效率低,并且有非特异性背景菌落产生,造成筛选困难。 Topo平端克隆 主要改良载体设计,把ccdB (Control of cell death)基因并入到mcs中,如果没有DNA片断插入,ccdB基因则会表达
Clone information and RNAi Feeding Protocol
AHRINGER LAB Clone information and RNAi Feeding Protocol Vector and inserts: Genomic fragments obtained by PCR were cloned into the Timmons and Fire feeding vector (L4440
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资料下载:
10908-Hieff Clone 零背景TOPO-TA克隆试剂盒(不含MCS).pdf 附 (下载 1 次)
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