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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
TRNAzol 总 RNA 提取裂解液
- 库存:
大量
- 供应商:
北京鼎国
- 规格:
100ml
| 编号 | 名称 | 规格 | 价格 | 品牌 | |
| GT1402-100ML | TRNAzol 总 RNA 提取裂解液 | 100ml | 560.00 | Genview |
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文献和实验粉末状后再按每管100 mg的量分装到1.5 ml离心管中,每管再加入600 µl含β-巯基乙醇的植物总RNA提取液)。 加入600 µl Buffer EX,用力混合均匀,13000 rpm离心10分钟。 小心吸取350 µl上清,转入一个洁净的1.5 ml离心管中。 在上清液中加入等体积的RNA沉淀液,盖上管盖混合均匀,13000 rpm离心5分钟。 弃上清,低速离心数秒使管壁上的上清液聚集到管底,用200 µl吸头吸尽残留的上清液。 加入1 ml 70%乙醇,盖上管盖,旋涡震荡悬浮
一、目的 研究基因的表达和调控时,需要从组织或细胞中分离纯化 RNA。RNA 质量的高低经常影响 RT-PCR、cDNA 库构建和 Northern Blot 等分子生物学实验的成败。 二、主要试剂 Trizol 是一种新型总 RNA 抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。 1. Trizol 试剂含有苯酚,具有毒性和刺激性,注重操作。 2. RNase 污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉,注重配带手套,样品尽可能盖严。 3. 细胞
在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase 的作用。 1. 提取组织RNA 时,每50~100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA 时,先离心沉淀细胞,每5-10 �106 个细胞加1ml Trizol 后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞; 2. 将上述组织或细胞
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