• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        总RNA提取(Trizol提取)

        互联网

        3238

        在收集到生物材料之后,最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase 的作用。


        1. 提取组织RNA 时,每50~100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA 时,先离心沉淀细胞,每5-10 �106 个细胞加1ml Trizol 后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞;


        2. 将上述组织或细胞的Trizol 裂解液转入EP 管中,在室温15~30C下放置5 分钟;


        3. 在上述EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.2ml 氯仿的量加入氯仿,盖上EP管盖子,在手中用力震荡15 秒,在室温下(15℃~30℃)放置2~3 分钟后,12000g(2℃~8℃)离心15 分钟;


        4. 取上层水相置于新EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.5ml 异丙醇的量加入异丙醇,在室温下(15℃~30℃)放置10 分钟,12000g(2℃~8℃)离心10 分钟;


        5. 弃上清, 按照每1ml TRIZOL 加1ml 75%乙醇进行洗涤, 涡旋混合,7500g(2℃~8℃)离心5 分钟,弃上清;


        6. 让沉淀的RNA 在室温下自然干燥;


        7.用Rnase-free water 溶解RNA 沉淀。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序