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XmiI (AccI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1481
  • 2025年10月09日
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    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : B
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - 基因组级别
    • - 蓝/白鉴定
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer B 10X Buffer Tango™
    ER1481 400 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER1481
    ER1482 2000 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER1482
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    B 37°C 100 0-20 0-20 0-20 50-100 20-50 1X or 2X

    Lambda DNA
    1.0%琼脂糖
    9 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液B:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    XmiI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍XmiI过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    琼脂糖包埋DNA酶切
    至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    兼容性末端
    GT^CGAC – Bsp119I, Bsu15I, Hin1I, Hin6I, HpaII, MaeII, MspI, NarI, Psp1406I, SsiI, TaqI。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 阻止酶切。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 无重叠 – 不影响。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...GTm5C G AC...3'
    3'...CA Gm5C TG...5'

    阻止酶切
    CpG

    5'...GTMKAm5C G ...3'
    3'...CAKMT Gm5C ...5'

    阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    9 2 1 2 1 1
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    1 1 1 1 1 2

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    • 寻找原核表达载体

      请问有哪些原核表达载体的mcs含有以下三个以上以下的酶切位点。谢谢 AarI CACCTGC,4,8 MfeI C/AATTG AatII GACGT/C MluI A/CGCGT AccI GT/MKAC MmeI TCCRAC,20,18 AceII GCTAG/C MscI TGG/CCA AclI AA/CGTT NaeI GCC/GGC AfeI AGC/GCT NarI GG/CGCC AflII C/TTAAG NdeI CA/TATG AgeI

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