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OliI (AleI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1631
  • 2025年10月02日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : R
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率80%
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - 蓝/白鉴定
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer R 10X Buffer Tango™
    ER1631 200 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER1631
    ER1632 1000 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER1632
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    R 37°C 0-20 0-20 0-20 100 0-20 50-100 2X

    Lambda DNA
    0.7%琼脂糖
    20 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液R:
    10 mM Tris-HCl (pH 8.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    OliI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    After 5050倍OliI过量酶切后,超过80%的酶切产物可以连接,超过95%的连接产物可以重新酶切。

    琼脂糖包埋DNA酶切
    至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 可能重叠 – 阻止酶切。
    EcoBI: 可能重叠 – 阻止酶切。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...CAm5C G NNm5C G TG...3'
    3'...GT Gm5C NN Gm5C AC...5'

    部分影响
    CpG

    5'...CAm5C G NNNGTG...3'
    3'...GT Gm5C NNNCAC...5'

    不阻止酶切
    EcoBI (TGA(N)8 TGCT)

    5'...TGm6A(N)4 CACG TGCT...3'
    3'...AC T(N)4 GTGCm6ACGA...5'

    阻止酶切
    EcoKI (AAC(N)6 GTGC)

    5'...Am6ACAC(N)4 G TGC...3'
    3'...T TGTG(N)4 Cm6ACG...5'

    阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    0-20 20-50 50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    20 1 0 0 0 0
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    0 0 1 1 0 0

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