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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD1634 | 20 µl (20 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD1634 | |
Reaction conditions
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 5 (phiX174 DNA) |
5 | 10 | 5 | 3 | 65°C, 5 min | 6 |
phiX174 DNA
1.0%琼脂糖
1 切割位点
配方
1 µl (1 FDU)是指在37°C,1X FastDigest® 缓冲液中5分钟内酶切1 µg ΦX174 DNA所需的酶量。
推荐反应条件
1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液,37°C。
1 µl FastDigest® AleI (OliI)可在
– 5分钟内酶切1 µg phiX174 DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 10分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
1 µl FastDigest® AleI (OliI)可在
– 5分钟内酶切1 µg phiX174 DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 10分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 部分影响。
EcoKI: 可能重叠 – 阻止酶切。
EcoBI: 可能重叠 – 阻止酶切。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 部分影响。
EcoKI: 可能重叠 – 阻止酶切。
EcoBI: 可能重叠 – 阻止酶切。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| CpG | 5'...CAm5C G NNm5C G TG...3' |
部分影响 |
| CpG | 5'...CAm5C G NNNGTG...3' |
不阻止酶切 |
| EcoBI (TGA(N)8 TGCT) | 5'...TGm6A(N)4 CACG TGCT...3' |
阻止酶切 |
| EcoKI (AAC(N)6 GTGC) | 5'...Am6ACAC(N)4 G TGC...3' |
阻止酶切 |
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 20 | 1 | 0 | 0 | 0 | 0 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 0 | 0 | 1 | 1 | 0 | 0 |
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FastDigest® AleI (OliI)
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