HincII (HindII)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER0491
  • 2025年09月28日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : Tango™
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer Tango™
    ER0491 500 u (10 u/µl) 1.00 ml ER0491
    ER0492 2500 u (10 u/µl) 1.00 ml ER0492
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    Tango™ 37°C 50-100 50-100 20-50 50-100 100 50-100 1X or 2X

    Lambda DNA
    1.0%琼脂糖
    35 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液Tango™:
    33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    HincII保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 200 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍HincII过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 可能重叠 – 阻止酶切。
    EcoBI: 可能重叠 – 阻止酶切。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...GTYRAm5C G ...3'
    3'...CARYT Gm5C ...5'

    部分影响
    CpG

    5'...m5C G TYRAm5C G ...3'
    3'... Gm5C ARYT Gm5C ...5'

    阻止酶切
    CpG

    5'...GTm5C G AC...3'
    3'...CA Gm5C TG...5'

    部分影响
    EcoBI (TGA(N)8 TGCT)

    5'...GTTGm6AC(N)7 TGCT...3'
    3'...CAAC TG(N)7 m6ACGA...5'

    阻止酶切
    EcoKI (AAC(N)6 GTGC)

    5'...GTYAm6AC(N)6 G TGC...3'
    3'...CART TG(N)6 Cm6ACG...5'

    阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    35 13 1 2 1 1
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    1 1 1 1 1 2

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