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Eco31I (BsaI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER0291
  • 2025年09月25日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : G
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - Dcm甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - 基因组级别
    • - 重组酶
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer G 10X Buffer Tango™
    ER0291 1000 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER0291
    ER0292 5000 u (10 u/µl) 2 x 1.00 ml 1.00 ml ER0292
    ER0297 200 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER0297
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    G 37°C 50-100 100 0-20 0-20 50-100 20-50 1X or 2X

    Lambda DNA (dcm- )
    0.7%琼脂糖
    2 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液G:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 50 mM NaCl, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    Eco31I保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 200 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50%�v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍Eco31I过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    琼脂糖包埋DNA酶切
    至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。

    备注
    • 底物为λ DNA (dcm- ) (#SD0021)。DNA上有两个Eco31I识别位点,但是其中一个位点很难切割。
    • 重叠的Dcm甲基化阻止Eco31酶切。为避免Dcm甲基化的影响,样本DNA需从dam-, dcm- 菌株中抽提,如GM2163 (#M0099)。
    • 低盐、pH> 8.0、高浓度甘油(>5%)或过量酶切都会导致星活性。
    • Eco31I在识别序列的下游切割,产生各种类型的DNA片段(5’-末端具有4 bp突出),该特点可用于PCR产物直接克隆。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 可能重叠 – 部分影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    Dcm (CCWGG)

    5'...Cm5CW GG TCTC...3'
    3'...G GWm5CC AGAG...5'

    部分影响
    CpG

    5'...GGTCTm5C G ...3'
    3'...CCAGA Gm5C ...5'

    不阻止酶切
    CpG

    5'...m5C G GTCTC...3'
    3'... Gm5C CAGAG...5'

    部分影响
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    20-50 50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    2 0 0 1 1 1
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    1 1 1 1 1 0

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    相关实验
    • IF 31!外泌体助力糖尿病研究(含文章思路解析)

      南京大学医学院附属鼓楼医院内分泌科毕艳教授团队和南京大学生命科学学院张辰宇、李靓教授团队合作,首次发现外泌体可介导脂肪-大脑间通讯并促进糖尿病认知功能障碍的发生。研究成果发表在国际著名期刊《Cell Metabolism》上。研究背景:糖尿病显著增加认知障碍的发生风险,严重影响老年人健康生存状态。临床研究表明控制血糖不能保护认知功能,因此需要进一步揭示糖尿病认知功能障碍的机制,寻找治疗糖尿病认知障碍的新策略。脂肪组织外泌体作为新型脂肪因子,可参与脂肪组织与其他外周组织器官间的生物

    • CD31分子

      CD31 分子   CD31   常用单克隆抗体或代号: SG134,TM3,HEC- 75;(PECAM、EndoCAM)   主要表达细胞: Pt,M,G,B,NK,Tsub [AS]   分子质量(kDa)和结构: gp140,血小板GPⅡa(IgSF)   功    能: 嗜同性或嗜异性(与CD38互为受体)粘附,炎症,En功能   CD31 Aka

    • 31 颈部层次

      佚名       一、颈部浅结构 1.皮肤 颈部的皮肤较薄,活动性较大,横纹明显,手术时,宜作横切口,以利愈合。 2.浅筋膜 颈部的浅筋膜一般较薄,含有少量脂肪,在颈前部和颈外侧部浅筋膜内含有颈阔肌。浅筋膜内还有浅静脉、浅淋巴结和皮神经,均位于颈阔肌的深面。 (一)颈阔肌 platysma(图31-1)为阔而薄的肌片

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