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参考说明书
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参考说明书
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参考说明书
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大量
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上海羽朵
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20次
真菌/酵母细胞线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
真菌/酵母细胞线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂是一种旨在通过特异性染色剂分析线粒体膜心磷脂的变化来定性或定量测定线粒体内含质量以及自由基、氧化物等对细胞线粒体的毒性与损伤作用的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种实验用真菌/酵母菌株线粒体的损伤/氧化的检测分析。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。
技术背景
真菌/酵母细胞是一种低等单细胞真核生物,具有细胞生长快,易于培养,遗传操作简单明了等原核生物的特点。作为模式生物,它具有比较完备的基因表达调控机制和表达产物的加工修饰能力,在分子遗传学方面认识最早,作为外源基因表达的细胞宿主。线粒体是细胞中重要的细胞器,其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。心磷脂(Cardiolipin)是线粒体膜上的主要成分之一。它对细胞氧化特别敏感。线粒体脂类分解,致使心磷脂显著减少,最终造成线粒体的严重损害。Nonyl-Acrydine Orange(NAO)是一种可自由通过细胞膜的染色剂,特异性地染色线粒体上的心磷脂,并发出荧光。一旦线粒体膜质量减少或受到损害以及被氧化,其荧光显著减弱。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
染色液(Reagent B) 微升
稀释液(Reagent C) 毫升
固着液(Reagent D) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液(Reagent D)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于真菌/酵母染色的容器
载玻片:用于染色观察
微型台式离心机:用于沉淀真菌/酵母细胞
培养箱:用于染色孵育
(共聚焦)荧光显微镜:用于细胞荧光分析
荧光分光光度仪:用于细胞荧光定量分析
详细实验步骤请咨询客服!!!
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文献和实验Externalization(磷脂酰丝氨酸外翻):Annexin V-FITC(绿色)染细胞膜,(3)检测线粒体产生的ROS:无荧光的HE(hydroethidine,氢化乙啶)可被ROS氧化为EthBr(ethidium bromide,溴乙啡啶),发红色荧光。NAO(nonyl acridine orange,烷化吖啶橙,可发荧光)能与非氧化的cardiolipin(心磷脂,可被ROS氧化)反应而失去荧光。 (4)线粒体IMS蛋白的释放:AIF,细胞色素c,分别用荧光二抗染色。 (5)Capase
)及磷脂过氧化氢谷胱甘肽氧化酶(PHGSH�x)的组成成分。GSH�x中每克分子酶四聚体含有4克原子硒,硒半胱氨酸的硒醇是酶的催化中心。该酶在人体内起抗氧化作用,能催化GSH与胞液中的过氧化物反应,防止过氧化物对机体的损伤。GSH�x活力下降,线粒体不可逆地失去容积控制和收缩能力并最后破裂。缺硒所致肝坏死可能是过氧化物代谢受损的结果。PHGSH�x与GSH�x不同,它存在于肝和心肌细胞线粒体内膜间隙中,作用是抗氧化、维持线粒体的完整,避免脂质过氧化物伤害。此外,I型碘甲腺原氨酸5′-脱碘酶(5′�ID
刺激物,并造成对眼睛的严重损伤的危险。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜。不要吸入其粉末。 14. 三氯乙酸(TCA) 有很强的腐蚀性。戴合适的手套和安全防目镜。 15. Triton X-100 引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和护目镜。 16. 过硫酸铵[(NH4)2S2O8] 对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命。操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作,操作完后彻底洗手。 17










