线粒体功能詹纳斯绿B（JGB）染色试剂盒

线粒体功能詹纳斯绿B染色试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

线粒体功能詹纳斯绿B染色试剂是一种旨在通过一种毒性较小的碱性染料特异性地使具有活性功能的线粒体呈现蓝绿色，从而判断线粒体功能的完整性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种线粒体（动物、人体、植物、昆虫等）制备物的功能检测。产品严格无菌，即到即用，活体检测，操作简捷，性能稳定。

技术背景

线粒体是细胞中重要的细胞器，其主要功能是提供细胞内各种物质代谢所需要的能量。线粒体大量存在于代谢旺盛的细胞中，如动物的心肌、肝、肾等器官和组织的细胞中。大量制备线粒体就是从这些器官组织中提取，或从组织培养细胞中提取。在光学显微镜下线粒体呈现为颗粒状、棒状或弯曲细线。詹纳斯绿B（Janus green B），是一种毒性较小的碱性染料。它可以对活细胞进行直接染色，在细胞质内可以看到被染成蓝绿色的线状或颗粒小体的线粒体。线粒体所以能显示出蓝绿色，是由于线粒体中具有细胞色素氧化酶系统，它是染料始终处于氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中的染料被还原呈无色。

产品内容

保存液（Reagent A） 微升
染色液（Reagent B） 微升
清理液（Reagent C） 微升
产品说明书 1份

保存方式

保存在－20℃冰箱里；染色液（Reagent B），避免光照；有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于线粒体染色的容器
光学显微镜：用于线粒体染色观察分析

实验步骤

实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reagent B）置于冰槽里融化，并放在暗室里。然后进行下列操作。

• 纯化线粒体染色

1. 从纯化的线粒体样品中移出100微升（含10⁶细胞中提取的线粒体）到新的预冷的1.5毫升离心管，置于冰槽里（如果不足100微升样品，加入适量的保存液（Reagent A）至最终容量为100微升）
2. 加入xx微升染色液（Reagent B），轻柔混匀
3. 放进暗室里，在室温下孵育20分钟
4. 即刻移取10微升到载玻片上，放上盖玻片
5. 在光学显微镜油镜下进行观察：功能完整的线粒体呈现蓝绿色圆形颗粒
6. 篮绿色强度显著减弱或呈现无色，表明线粒体细胞色素氧化酶系统功能不全或功能丧失

• 活体细胞染色

1. 将待测细胞（1 X 10⁶细胞）移入到1.5毫升离心管
2. 放进微型台式离心机离心1分钟，速度为500g（或2000RPM；例如eppendorf 5415）
3. 小心抽去上清液
4. 加入xx微升清理液（Reagent C）或保存液（Reagent A）
5. 加入xx微升染色液（Reagent B），充分混匀
6. 放进暗室里，在室温下孵育20分钟
7. 即刻移取10微升到载玻片上，放上盖玻片
8. 在光学显微镜油镜下进行观察：功能完整的线粒体呈现蓝绿色线状或颗粒小体
9. 篮绿色强度显著减弱或呈现无色，表明线粒体细胞色素氧化酶系统功能不全或功能丧失

注意事项

1. 本产品为5次操作
2. 建议操作在无菌状态下进行
3. 线粒体样品操作须在低温下进行，且操作快速
4. 操作时，须戴手套
5. 建议染色完成后，即刻进行显微镜观察分析
6. 孵育时，须避免光照
7. 本公司提供系列线粒体试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定显色清晰

使用承诺

上海羽哚生物秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。


友情提醒

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