万类生物试剂促销:试剂盒8折优惠,CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒-500T 原价500元,现价400元。
产品名称:CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(试用装10T)
产品概述:
CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8 (CCK-8))是一种基于四唑盐WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
本试剂盒提供的CCK-8溶液不需配制,可以直接加入到细胞样品中,对细胞无毒性并且相当稳定,因此可以长时间孵育。另外 , 本方法产生的Formazan是水溶性的 , 不仅省去了溶解步骤 , 更减少了误差。
保存条件:4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存两年有效。
注意事项:
1. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。
2. 培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前,建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入CCK-8试剂后的培养时间。
该产品被引用文献(仅展示部分):
1、Peng X; Hu X; Zhang Y, et al., Extraction, characterization, antioxidant and anti-tumor activities of polysaccharides from Camellia fascicularis leaves. Int J Biol Macromol 2022.
PubMed: 36152704
2、Zhang Y; Yin C; Wei C, et al., Exosomal miR-625-3p secreted by cancer-associated fibroblasts in colorectal cancer promotes EMT and chemotherapeutic resistance by blocking the CELF2/WWOX pathway. Pharmacol Res 2022, 186, 106534.
PubMed: 36336217
3、Ding C; Ni L; Liu Q, et al., Cold Air Plasma improving Rheumatoid Arthritis via Mitochondrial Apoptosis Pathway. Bioengineering & Translational Medicine, e10366.
PubMed: 36684093
4、Lin J J; Chen W; Gong M, et al., Expression and Functional Analysis of lncRNAs Involved in Platelet-Derived Growth Factor-BB-Induced Proliferation of Human Aortic Smooth Muscle Cells. Front Cardiovasc Med 2021, 8, 702718.
PubMed: 34557530
5、Wang L; Feng Y; Wang J, et al., Arbutin Ameliorates Murine Colitis by Inhibiting JAK2 Signaling Pathway. Front Pharmacol 2021, 12, 683818.
PubMed: 34594215
操作流程:
1. 在96孔板中接种细胞悬浮液(100μl/孔),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小、细胞增殖速度的快慢等因素决定。
2. 根据实验需要确定特定的药物刺激浓度以及时间。
3. 药物处理细胞后,每孔加入10μlCCK-8溶液。如果起始的培养条件体积为200μl,则需加入20μlCCK-8溶液,以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担心所使用的药物会干扰检测,需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。
4. 在细胞培养箱内继续孵育1-4h , 具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5、1、2和4h后分别用酶标仪检测,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续试验。
5. 用酶标仪测定在450nm处的吸光值。若无450nm滤光片,可以使用420-480nm的滤光片。
6. 活力计算:
*细胞活力(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100
A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度。
A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度。
A(0加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度。
*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力。