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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输;-80℃保存
- 保质期:
有效期6个月
- 英文名:
TOP10 Chemically Competent Cell
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
10×100μl
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
| TOP10 Chemically Competent Cell |
11801ES80 |
10×100 μL |
166.00 |
| TOP10 Chemically Competent Cell |
11801ES92 |
100×100 μL |
1236.00 |
产品描述
本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化,转化效率可达108 cfu/μg DNA以上,广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。可用于构建克隆,蓝白斑筛选等,具有链霉素(StrR )抗性。
TOP10感受态细胞基因型:F-mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15 △lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (StrR ) endA1 nupG
产品组分

| 组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
| 11801ES80 |
11801ES92 |
||
| 11801-A |
TOP10 感受态细胞 |
10×100 μL |
100×100 μL |
运输与保存方法
干冰运输;-80℃保存,有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
注意事项
1. 本产品应保存在-80℃,不可反复冻融,以免降低感受态细胞的转化效率。
2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长,感受态细胞刚化冻时转化效率最高。
3. 混入质粒时应轻柔操作。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
5. 本产品仅作科研用途!
使用方法
1. 取100 μL感受态细胞,冰浴、解冻(大约5 min)。
2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻弹匀,冰浴静置25 min。
【注】:所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
3. 42℃水浴中热激45 sec,然后快速将EP管转移到冰上,静置2 min。
【注】:此过程不要晃动,否则会降低转化效率。
4. 向离心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB或2YT培养基,混匀后37℃,200 rpm复苏60 min。
5. 5000 rpm离心1 min收集菌体,留取100 μL左右上清涂布至含有相应抗生素的培养板上,37℃培养过夜。如进行蓝白斑筛选操作,请将平板放37℃培养至少13 h。
HB220614
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文献和实验TOP10 chemically competent cells
Detergent is a major inhibitor of competent cell growth and transformation. Glass and plastic must be detergent free for these protocols. The easiest way to do this is to avoid washing glassware, and simply rinse it out. Autoclaving glassware filled
Preparing chemically competent cells
Materials Plate of cells to be made competent TSS buffer LB media Ice Glassware & Equipment Falcon tubes 500μl Eppendorf tubes, on ice 200ml conical flask 200μl pipetman or repeating
Transforming chemically competent cells
Method Thaw TSS cells on ice. Add DNA, pipette gently to mix (1μl of prepped plasmid is more than enough). Note: If you are adding small volumes (~1μl), be careful to mix the culture well. Diluting the plasmid
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