- ￥138
- 翌圣生物（Yeasen）
- 上海
- 11801ES80
- 2026年08月05日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
干冰运输；-80℃保存
- 保质期：
有效期6个月
- 英文名：
TOP10 Chemically Competent Cell
- 库存：
大量
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格：
10×100μl
本品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化，转化效率可达108 cfu/μg DNA以上，广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。可用于构建克隆，蓝白斑筛选等，具有链霉素(StrR )抗性。
TOP10感受态细胞基因型：F-mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15 △lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu) 7697 galU galK rpsL (StrR ) endA1 nupG
- 适用广泛：可用于克隆哺乳动物基因组 (甲基化) 和植物 DNA、文库构建或任何常规分子克隆应用
干冰运输；-80℃保存，有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。
Q：pUC19 (control vector, 10 pg/μL)是什么抗性？
A：氨苄抗性的。
Q：11801 和 11802 有什么区别？
A：11802 稳定一些，比较常用。
Q：最大可以转化多大的质粒？ 约 20kb 可以吗？
A：转化质粒的大小与菌株有关， DH5α和 Top10 感受态细胞适合小于 15kb 的质粒。
Q：菌体大片长，无单个菌落，是什么原因？
A：先用感受态细胞转到含抗生素的培养基中，如果不长，说明抗生素没有失效。在排除抗生素是否失效的原因后，检查转化步骤，在转化操作时，请勿将菌体全部涂布于平板上。因为大量菌体的存在抑制正常转化子的生长。改正的方法有两种：一是省去 37℃ 复苏培养的步骤，这样不但节省了时间，而且也不出现云雾了；二是 37℃复苏后只吸取 50-100 µL 菌液涂布即可。
Q：涂布 Amp＋板后，总是有很多卫星菌落，单菌落长不大。
A：Amp 抗性板铺板密度过高或培养时间过长都会导致出现对 Amp 敏感的卫星菌落， 因此涂布 Amp 抗性板时菌密度应适当降低，同时 37℃培养时间不超过 20 h。另外推荐选择培养基中使用羧苄qing霉素代替氨苄qing霉素(Amp)，并将抗生素浓度提高到 100µg/mL，可使情况改善。
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文献和实验TOP10 chemically competent cells
Detergent is a major inhibitor of competent cell growth and transformation. Glass and plastic must be detergent free for these protocols. The easiest way to do this is to avoid washing glassware, and simply rinse it out. Autoclaving glassware filled
Preparing chemically competent cells
Materials Plate of cells to be made competent TSS buffer LB media Ice Glassware & Equipment Falcon tubes 500μl Eppendorf tubes, on ice 200ml conical flask 200μl pipetman or repeating
Transforming chemically competent cells
Method Thaw TSS cells on ice. Add DNA, pipette gently to mix (1μl of prepped plasmid is more than enough). Note: If you are adding small volumes (~1μl), be careful to mix the culture well. Diluting the plasmid
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